Курсовая работа Лейкоз крупного рогатого скота  хозяйство ООО «Агрофирма имени Крупской»

Содержание.

1. Введение-------------------------------------------------------------------

2. Обзор литературы-------------------------------------------

2.1. Краткие сведения о болезни----------------------------

2.2. Возбудитель болезни-------------------------------------

2.3. Эпизоотологические данные------------------------------

2.4 Клиническое проявление заболевания----------------

2.5. Патологоанатомические изменения-----------------------

2.6. Диагностика заболевания. Дифференциальный диагноз------

2.7. Иммунитет и иммунизация------------------------------------------

2.8. Лечебно-профилактические мероприятия, меры борьбы-----

3. Собственные исследования------------------------------------

4. Заключение-----------------------------------------------------

5. Предложения хозяйству----------------------------------

6. Список использованной литературы-----------------------

7. Приложения---------------------------------------------------
Введение

Лейкоз крупного рогатого скота - заболевание довольно распространенное в мире. Возникнув на Украине во время проб усовершенствования молочное продуктивность поголовья коров путем «голштинизации», сейчас заболевание имеет потенциальные способности привести к 0 генофонд молочных животных в стране. Учитывая тот факт, что зоотехнические методы мало согласовываются с ветеринарией, что факт распространения возбудителя или наличие АТ к нему в крови животных не учитывается при проведении племенной роботы, заболевание прогрессирует и пораженость стада КРС по Украине составляет приблизительно 67% [16].

При отсутствии планомерной борьбы, болезнь имеет тенденцию к дальнейшему нарастанию. Заболевание приводит к потере продуктивности животных, вынужденной их выбраковке, невозможности использовать больных животных для воспроизводства. Борьба с лейкозом крупного рогатого скота требует затрат на диагностические исследования, изоляцию инфицированных животных и другие ветеринарно-санитарные мероприятия. Положение усложняется тем, что развитие клинических и патологических проявлений при этом заболевании может продолжаться в течение нескольких месяцев и лет. Заметно уменьшается продуктивность скота, снижается качество получаемой продукции, которое имеет большое значение, особенно для курортной зоны Украины. Поэтому оздоровление животноводческих хозяйств от лейкоза крупного рогатого скота является одним из приоритетных направлений е системе профилактики и мер борьбы с инфекционными болезнями животных в Автономной Республике Крым [4].

Как известно хозяйство ООО «Агрофирма имени Крупской» на протяжении ряда лет являлось неблагополучным по лейкозу. Недополучение приплода, снижение качества продукции, продуктивности животных, вынужденный убой принес огромный ущерб хозяйству, кроме того хозяйства остается возможным источником распространение болезни. Поэтому выбранная мной тема является актуальной.

2. Обзор литературы.

2.1. Краткие сведения о болезни.

2.1.1. Определение болезни.

Лейкоз КРС – хроническая инфекционная болезнь опухолевой природы, основной признак которой – злокачественное разрастание клеток кроветворных органов с нарушением их созревания, в результате чего происходит диффузная инфильтрация органов этими клетками или проявляются опухали [1].

2.1.2. Историческая справка.

Заболевание впервые было описано под названием «лейкопения» Р. Вирховым в 1845г. у человека. Первый случай лейкоза крупного рогатого скота описан немецким исследователем O. Siedarotzky в 1878г. Автор, выполнив обзор по лейкозам животных, пришел к заключению, что в Саксонии болезнь имеет тенденцию к дальнейшему распространению.

Первые сведения про лейкоз лошадей опубликовал Лейзеринг в 1858г., про лейкоз свиней – в 1865г [7].

С течением времени у крупного рогатого скота при лейкозе P. Kmeth O. и Volkmann 1916г. выявили изменения в лейкоцитарной формуле. В частности, ими установлено увеличение общего количества лейкоцитов, лимфоцитов и появление ядерных клеток, служащих, по мнению исследователей, специфическим признаком для заболевания [1].

Лейкоз, как заболевание опухолевой природы, впервые был представлен в работах русских ученых К. Славянского и А. Щастного (1875г.), которые сравнивали лейкемические разрастания с опухолевым как по внешнему виду, так и по биологическим свойствам тканевого роста [1].

В настоящее время теория опухолевого происхождения лейкоза не вызывает возражений.

В 1921г. В. Элерман заменил термин «лейкемия» на «лейкоз», что точно отвечает сути заболевания, которое иногда проходит без количественных изменений лейкоцитов в перефирической крови [7].

Впервые термин «лейкоз» введенный по отношению к лейкимическим заболеваниям кур, перенесен в патологию крупного рогатого скота I. Dobbersteir (1958г.). Автор высказал мнение, что патологические клетки при данной болезни происходят в ретикулоэндотелиальной системе. В этот же период большинство ученых пришло к заключению, что лейкоз следует относить к злокачественным опухолям с необратимым процессом [1].

Сведения про выделение вируса от больных на лейкоз коров появились в середине 60-х (Датчер, 1964). Миллер выявил в сыворотки больных на лейкоз коров специфические к бычьему лейкозному вирусу (BLV) антитела.

Особую значимость в изучении лейкоза крупного рогатого скота приобрели работы по вирусной этиологии болезни, что определило развитие основных направлений проблемы [7].

Советские ученые внесли большой вклад в изучение проблемы лейкоза крупного рогатого скота. В бывшем СССР выполнены фундаментальные исследования по клинико-гематологической и цитоморфологической диагностике (Б. Б. Ермалаев, 1968г., Г. А. Симонян, 1975г., Н. М. Кострамининов, 1975г.), патоморфологии (Т. П. Кудрявцева, 1969г.), биохимическим, патогенетическим (Г. Ф. Коромыслов, 1975г.), генетическим (Д. В. Карликов, 1982г.), эпизоотологическим (Э. М. Нымен, 1970г., В. А. Бусол, 1983) аспектам [13].

В нашей стране возникновение лейкоза связывают с завозом в 1940-47гг. животных из Германии в хозяйства на территории Советского Союза.

2.1.3. Экономический ущерб.

Это заболевание создает значительные экономические убытки вследствие недополучения молодняка и приплода, выбраковки и убоя, утилизации лейкозных туш, сдачей на мясо племенного молодняка от больных животных, ограничения в использовании молока, а также через потери на проведение ветеринарно-санитарных мероприятий.

Самое опасное то, что вирус лейкоза крупного рогатого скота опасен для здоровья человека. Было установлено структурное и иммунологическое родство вируса лейкоза крупного рогатого скота с вирусом Т-клеточного лейкоза человека [1].

По данным мировой статистики, заболевание лейкозом людей больше всех регистрируется в тех странах, где широко распространен лейкоз крупного рогатого скота [13].

2.2. Возбудитель болезни.

Вирус лейкоза крупного рогатого скота является В-лимфотропный РНК-содержащий вирус, относящийся к семейству Retroviridae, рода онковирус. По структуре и морфологии вирус лейкоза относится к типа С, а по онкогенным свойствам делится на три группы:

1.  Медленотрансформирующийся, или вирусы хронического лейкоза.

2.  Быстротрансформирующийся, или вирус острого лейкоза.

3.  Трансрегулирующиеся вирусы (по структуре и морфологии вирусы похожи с вирусом СПИДа)

Вирусы хронического лейкоза - полноценные вирусы, их геном содержит: dad - кодирующие структурные белки, pol - обратная транскриптаза, env-гликопротеид оболочки. Они не несут онкогенов. Вирусы острых лейкозов имеют в своем геноме онкогены V-onko. [8].

Согласно данным многих ученных вирионы вируса крупного рогатого скота обладают выраженным полиморфизмом, вылечены и внутреннего строения. Большинство вирионов имеют сферическую форму диаметром 90-120 нм, состоящие из сердцевины, внутренней белковой мембраной и липидосодержащей наружной. Внешняя оболочка представлена двухконтурной мембраной, на поверхности, которой отростки 10-12 нм с пуговкообразными утолщениями на концах. В сердцевине различают капсулу сердцевины с иксоэдральным строением и нуклеотид, расположенный в центре вириона размером 60-90 нм. [16,25]. В вирионах обнаружено 5-7 белков. В состав наружной оболочки входят 2 белка – поверхностный и трансмембранный, на них имеются типоспецифические антигенные детерминанты, индуцирующие синтез вируснейтрализующих антител. Сердцевина состоит из 3-4 белков, один из них непосредственно связан с РНК. Белки сердцевины являются группоспецифическими антигенами. С сердцевиной вирионов ассоциировано более 10 ферментов. В отличие от других вирусов, убивающих зараженную клетку, ретровирусы вызывают хроническую инфекцию чувствительных клеток. Продолжительная экспрессия вирусных генов обычно не сопровождается цитотоксическим эффектом, так как не вызывает гибель клетки. Может лишь усиливаться клеточная пролиферация или не обнаруживаются никаких изменений характера роста клеток [25].

Бычий лейкозный вирус морфологически сходен с возбудителем лейкоза животных других видов. Лейкоз КРС бал экспериментально воспроизведен на овцах, козах, свиньях, кроликах, мышах. Исследования, проведенные H. Rainer на 13 новорожденных обезьянах показали, что после введения им вируса лейкосодержащего матерьяла от крупного рогатого скота у 9-ти из них через 2-6 дней появились противовирусные антитела и вирус лейкоза. По данным J. Schipper вирус лейкоза крупного рогатого скота идентичный вирусам, которые вызывают прогрессивную пневмонию овец, инфекционную анемию коней. Доказано структурное схожесть мажорных белков сердцевины вируса лейкоза крупного рогатого скота и вируса Т-клеточного лейкоза человека.

Проведенные сероэпидемиологические исследования касающиеся изучения связи лейкозов человека и крупного рогатого скота, показали, что людей инфецированых вирусом лейкоза КРС не выявлено. Считается что заражение вирусом лейкоза крупного рогатого скота маловероятно, или невозможно вообще [16].

Вирус благодаря своей биологии, имеет возможность встраиваться в геном животного в виде ДНК-копии и продолжительное время не проявляться, с чем связан продолжительный латентный период заболевания [27].

Устойчивость: Вирус лейкоза крупного рогатого скота относительно устойчив к ультрафиолетовому облучению. Чувствителен к жирорастворителям, детергентам [25] и температурным воздействиям, разрушается при повторных замораживаниях и оттаиваниях и при нагревание до 560С 15 мин. Пастеризация молока 740С в течение 16 секунд разрушает его, и он теряет инфекционность. Вирус обнаруживается в молоке после хранения в течение 72 ч. при 10С, но уже при 10 и 14 0С его не обнаруживают через 48 и 24 часа соответственно.

2.3. Эпизоотологические данные.

В природных условиях к вирусу лейкоза восприимчивы крупный рогатый скот, лошади, свиньи, козы, овцы, кролики, все виды птицы, особенно куры. У коров заболевание наблюдается в основном в 4-9 месячном возрасте, но иногда болеют животные и до 3-летнего возраста. Заболевание молодых животных характеризуется спородичностью и поражаются лимфатические узлы, тимус, иногда кожа. Заболевание взрослых коров протекает в виде энзоотий с длительным латентным периодом [7].

Источником возбудителя заболевания являются зараженные вирусом лейкоза животные, которые выделяют вирус с кровью, молоком, различными секретами и экскретами, которые содержат зараженные лейкоциты. Выделение вируса лейкоза во внешнюю среду обусловлено нарушением кровообращения, восполительными процессами в органах, высокой порозностью или разрывом стенок кровеносных сосудов при травмах кожи и слизистых.

Передача возможна воздушно-капельным, фекально-оральным, трансмиссивным и контактно-травматическим путями. Считают, что заражение может происходить также трансплацентарно в последние 6 мес. беременности и через молозиво инфицированной матери [9].

Таким образом, заражение восприимчивого животного вирусом лейкоза является в основном следствием длительного непосредственного контакта инфицированных и здоровых восприимчивых животных, либо результатом нарушения правил асептики при ветеринарных и зоотехнических манипуляциях.

Зараженность коров лейкозом в разных странах колеблется от 10 до 70%, частота гибели от лейкоза составляет около 10 случаев на 100 тыс. голов [7].

2.4. Клиническое проявление заболевания.

У взрослых животных течение заболевания – хроническое (месяцы, годы), без явных нарушений общего состояния организма. Часто отмечают лимфолейкоз, лимфо - и ретикулосаркому. Во время лейкозов, в зависимости от интенсивности разрастания лейкозной ткани и вовлечения в процесс тех или иных жизненноважных органов, симптомы заболевания в одних случаях возрастают днями и неделями, в других – месяцами и годами. Смерть может наступить быстро или через длительное время (6 и более лет).

Различают три стадии развития заболевания: начальную, развернутую и терминальную [7].

Начальная стадия Характеризуется системным или частичным поражением в основном органов кроветворной системы (лимфатических узлов, селезёнки, костного мозга). Во время этой стадии клинических признаков нет. При гематологическом исследовании наблюдаются количественные изменения в клеточном составе крови – увеличение количества лейкоцитов, возникновение незрелых и патологически измененных форм клеток. На этой стадии наличие инфекции устанавливают иммунологическими исследованиями [7].

В развернутой стадии происходит поражение всей кроветворной ткани. Размножение клеток отмечают не только в органах гемопоэза, а и в других. Характерным является гематологические нарушения в крови, которые в зависимости от формы лейкоза сопровождаются увеличением количества лимфоцитов, лимфобластов, гемоцитобластов и одновременным снижением количества нейтрофилов. В это время появляются различные клинические признаки, связанные с опухолевидными разрастаниями в различных и лимфатических узлах: экзофтальм, увеличение лимфатических узлов, селезенки, печени, опухоли в различных участках тела [7].

Во время Терминальной стадии у животных появляются специфические клинические признаки лейкоза: увеличение поверхностных лимфатических узлов (подчелюстных, околоушных, предлопаточных, надвыменных и коленной складка), а также глубоких паховых лимфатических узлов; образование в лимфатических узлах, внутренних органах и тканях опухалей; помутнение роговицы. У молодняка выявляют опухали и в зобной железе. Пораженные лимфатические узлы подвижные, безболезненные, иногда достигают размеров кулака. Лейкозные изменения в печени, селезенке, матке, яичниках определяют при ректальном исследовании, увеличение границ печени – перкуссией. Из неспецифических сопутствующих признаков выделяют цианоз или желтушность слизистых оболочек, снижение молочной продуктивности. Наблюдают сердечную недостаточность, падение кровяного давления, отёки подкожной клетчатки в области межчелюстного пространства и подгрудка. Иногда наблюдают нарушение деятельности пищеварительного канала (поносы, запоры, атония, тимпания) [7].

Качественные гематологические показатели в этой стадии имеют постоянный, иногда прогрессирующий характер с высоким уровнем лимфоцитоза.

Нагаева Л. И. определила следующие стадии инфекционного процесса при лейкозе: инкубационная, бессимптомного вирусоносительства, гематологическая, опухолевого проявления заболевания [10].

Инкубационный период. Экспериментально установлено, что после заражения телят лимфоцитами периферической крови от инфицированного донора вирус обнаруживали в селезёнке реципиента спустя 8 дней после инокуляции. В крови этот вирус выявляли через 14 дней и позже.

Результаты, полученные разными исследователями по выяснению сроков инкубационного периода у крупного рогатого скота при лейкозе и онковирусной инфекции, неоднозначны. Имеются сведения о заражении подопытных до появления специфических антител в период от 15 дней до 4-6 месяцев.

В инкубационном периоде антитела в сыворотке крови появляются в ответ на заражение организма ВЛКРС не сразу, а спустя определённое время [10].

Стадия бессимптомного вирусоносительства.

Состояние антителоносительства не вызывает у животных видимых физиологических или патологических отклонений. У коров не наблюдается нарушений воспроизводительной функции и деятельности молочной железы, приросты массы молодняка соответствуют кормовым рационам, полностью сохраняются поведенческие рефлексы.

В состоянии вирусоносительства животные могут находиться на протяжении всей своей жизни. Только у незначительной части животных сопровождается признаками болезни [10].

Гематологическая стадия лейкоза протекает на алейкемическом, суб - и лейкемическом уровнях.

Алейкемическая картина крови, которую устанавливают по процентному содержаниюс лейкоцитов в лейкоцитарной формуле, обычно проявляется без изменений общего количества лейкоцитов в единице объёма крови. По продолжительности чаще всего длится 1-3 года.

Более продолжителен период гематологического проявления болезни – фаза хронического течения с алейкемическими показателями крови. Чаще всего сублейкемическое течение лейкоза устанавливают у коров 3-5 лет. У больных лейкозом коров с сублейкемической картиной крови отмечают постепенное нарастание общего количества лейкоцитов в периферической крови с преобладанием лимфоидных форм. Такое постепенное нарастание лейкоцитов обычно регистрируют постоянно, иногда – с явлениями чередования ремиссий и рецидивов [10].

Лейкемическая фаза гематологической стадии лейкоза характеризуется гиперлейкоцитозом (более 40 тыс. в 1мкл крови) и повышением содержания в лейкоцитарной формуле молодых малодифференцированных клеток. По продолжительности лейкемическое течение лейкоза регистрируется 3-3-3,5 года [10].

Опухолевая (клиническая) стадия может наблюдаться у животных разного возраста. Она чаще начинается в «недрах» суб - и лейкемической фазы гематологической стадии лейкоза. Продолжительность опухолевой стадии зависит от вовлечения в патологический процесс лимфатических узлов, регионарных жизненноважным органам [10].

Иванова Н. И. с соавторами выделяют 2 основные формы лейкоза КРС: энзоотическую и спородическую. Последняя форма встречается редко и поражает молодых животных (до 3-летнего возраста), проявляется клинико-морфологическими разновидностями [6]:

1) ювенальный лейкоз (форма лейкоза у телят) – наиболее часто наблюдается у телят моложе 6 месячного возраста, характеризуется увеличением лимфоцитов и часто инфильтрацией костного мозга;

2) тимусная форма лейкоза встречается у телят моложе 2-летнего возраста, характеризуется увеличением тимуса;

3) кожная форма встречается у телят от 1 до 3 летнего возраста, характеризуется узелковой инфильтрацией кожи.

Спорадический лейкоз не представляет особого интереса в экономическом плане. Этиологический агент при этой форме болезни не выявлен.

Энзоотический лейкоз – контагиозная болезнь с длительным латентным периодом, во время которого в крови выявляют вирус лейкоза КРС (ВЛКРС) и АТ к нему. В основном встречается у крупных животных, наиболее часто в возрасте 5-8 лет. Болезнь характеризуется пролиферацией неопластических элементов, в результате чего образуется отдельные опухолевые массы и (или) диффузная инфильтрация различных тканей и органов [6].

В опухолевый процесс вовлекаются селезенка, сычуг, сердце, почки и др. органы. Клинические проявления зависят от вовлеченных в патологический процесс органов, степени опухолевого роста и диссеминации неопластического процесса [6].

2.5. Паталогоанатомические изменения.

Патоморфологические изменения у крупного рогатого скота при лейкозе очень разнообразны, как по частоте и характеру поражения органов и тканей, так и по формам гистологического проявления.

Обнаруживается диффузная или очаговая инфильтрация на серозных покровах и во всех внутренних органах. Наблюдается лейкоз или ретикулез. К. лейкозам относят лимфомиелолейкоз и гемобластоз; к ретикулезам - лимфо-, ретекулосаркому, системный ретикулез, лимфогранулематоз и плазмоцитому [16].

При лимфосаркоме и лимфогранулематозе лимфоузлы бугристые, капсула сращена с паренхимой, на разрезе часто обнаруживают кровоизлияния и казеозные очаги некроза желтого или коричневого цвета. Селезенка при этих формах лейкозов обычно не увеличена.

При лимфоидном, слабодифференцированном и миелоидном лейкозах селезенка увеличена. При первых двух формах она буро-красного цвета с четко выраженной красной и белой пульпой за счет гиперплазии фолликулов. В более поздней стадии болезни граница между белой и красной пульпой стерта. При миелоидном лейкозе селезенка красно-малинового цвета, фолликулы плохо заметны, а в отдельных участках отсутствуют, ткань рыхлой консистенции с кровоизлияниями. Лимфоузлы при лимфоидном лейкозе сочные, саловидные, равномерно увеличены, не срастаются с окружающей тканью, капсула снимается легко, на разрезе она серо-белого цвета,

При всех формах лейкоза отмечают очаговые или диффузные разрастания серо-белого или серо-розового цвета в печени, почках, толще сердечной мышцы, органах пищеварения, матке, скелетных мышцах, диафрагме и других органах [26]. Печень при диффузном поражении увеличена, хрупкой или ломкой консистенции. В паренхиме находят саловидные серо-белые узелки размером от горошины до грецкого ореха, почки увеличены и достигаю 8-10 кг. В серозных покровах находят новообразования толщиной 6-8 см., покрытые тонкой серозной оболочкой. На разрезах мышц обнаруживают саловидные лейкемические и дегенеративные изменения [6].

2.6. Диагностика заболевания. Дифференциальный диагноз.

Важным условием профилактики и борьбы с лейкозами крупного рогатого скота является своевременна достоверная диагностика и изоляция больных и подозрительных в заболевании животных.

Диагностика лейкозов осуществляется клиническими, гематологическим, серологическими, патологоанатомическим и гистологическим методами. Наибольшую значимость для своевременной локализации и предотвращения распространения лейкозов имеет ранняя диагностика при первичном установлении заболевания. В этих случаях надежность диагностики обеспечивается применением комплекса специальных приемов, комиссионных убоев, патологоанатомической экспертизы, гистологических исследований органов и тканей и эпизоотологичес­кого анализа [12].

Прижизненный диагноз ставят на основании клинических данных и результатов лабораторного исследования цельной крови и сыворот­ки крови.

В настоящее время выявление инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота животных осуществляют с помощью следующих методов:

1.Комплекса серологических реакций;

2.Обнаружение вируса или его антигенов.

До 1986 года в СССР единственным тестом прижизненной диаг­ностики лейкоза крупного рогатого скота был гематологический ме­тод, сущность которого заключается в обнаружении в периферической крови повышенного количества лейкоцитов, в основном лимфоидного ряда, и слабо дифференцированных клеток (родоначальных пролимфоцитов, лимфобластов), а также полиморфных, атипичных клеток кровет­ворных органов [13].

На этой основе для диагностики лимфоидного лейкоза был разработан "лейкозный ключ", в основе которого положены: число и % Лим­фоцитов для двух возрастных категорий крупного рогатого скота - до 3-х лет и старше 3-х лет. В последующем, на основе совершенство­ваний этого метода в различных странах предложено II «лейкозных ключей»: гановерский, стокгольмский, копенгагенский, кильский, чехословацкий, нижнесаксонский, геттингентский, румынский, комбиниро­ванный (гетце-бендиксен), вустерхаузенский и эйнаттенский [11].

В бывшем СССР в 1965 году группой сотрудников ВИЭВ был разработан отечественный "лейкозный ключ", модифицированный в 1969 и 1976 годах.

Все "лейкозные ключи" основаны на количественных показателях лимфоидных форм лейкоцитов в единице объема крови, которые можно считать критерием заболевания животных лейкозом. Отличительной сто­роной применяемых в мире " ключей" является лишь степень жесткос­ти диагностических критериев.

В гематологии принято различать лейкемическую, сублейкемическую и алейкемическую формы лейкоза. Случаи с особо высоким ко­личеством лейкоцитов (100000 и более) называют гиперлейкемическими, а с количеством лейкоцитов ниже нормы - лейкопеническими. [11].

Однако использование гематологического метода позволяло обнаруживать только животных с изменениями крови и морфологическими проявлениями лейкоза. Из-за вариабельности крови у молодых животных их гематологически исследовать на лейкоз начинают с 2-х летнего возраста, в то время как он у животных проявляется в любом воз­расте.

В связи с этим при использовании гематологического метода диагностики в системе противолейкозных мероприятий в неблагополучном по лейкозу стаде длительное время (исследование крови на лейкоз проводят 2 раз в год при 2-3х месячной продолжительности инкуба­ционного периода), передерживаются животные, находящиеся в стадии скрытого вирусоносительства [11].

Кроме этого гематологический метод отличается трудоемкостью. В течение рабочего дня производительность труда специалиста, свя­занного с полным гематологическим исследованием (подсчет общего количества лейкоцитов а единице объема крови и выведение лейкоци­тарной формулы) на лейкоз, ограничивается 22-25 животными [12].

В настоящее время основным методом прижизненной диагностики лейкоза является серологический: реакция иммуннодиффузии в агаровом геле РИД). Гематологический и клинический методы используются для установления стадии полного развития заболевания у серопозитивных животных.

РИД в качестве диагностического теста при лейкозе используют на крупном рогатом скоте, начиная с 4-6 месячного возраста. Она отличается простотой в применении, высокой чувствительности и экономичностью. С ее помощью в сыворотке крови зараженных вирусом лейкоза крупного рогатого скота животных обнаруживают специфические антите­ла, индуцированные вирусом лейкоза крупного рогатого скота, в виде линий преципитации. Выявление этих антител свидетельствует о персистенции вируса лейкоза крупного рогатого скота в организме круп­ного рогатого скота. Серопозитивнее состояние животного не корреги­рует с гематологическим и опухолевым проявлениями лейкоза [13].

РИД выявляет зараженных животных на всех стадиях инфекционного процесса, за исключением инкубационного периода.

Нахмансон В. М. и др. (1991) пришли к заключению, что РИД обеспечивает оздоровление хозяйства от лейкоза крупного рогатого скота независимо от стадии проявления инфекционного процесса, уровня эпизоотической напряженности по лейкозу крупного рогатого скота, технологии ведения и продуктивной результативности молочного ско­товодства, обеспеченности животноводческими объектами и др.

Однако РИД также имеет свои недостатки (например, выпадение серологического ответа). Установлено, что среди инфицированных жи­вотных дойного стада постоянно имеются особи, сыворотка крови кото­рых отрицательно реагирует в РИД. Они служат скрытым источником инфекции в оздоравливаемом стаде [13].

Выпадение, серологической реакции затрудняет своевременное выяв­ление и изолирование источника инфекции и тем самым удлиняет сроки оздоровления неблагополучных по лейкозу стад. Многие отечественные и зарубежные исследователи объясняют выпадение серологической реак­ции передачей антител молозивом потомству. За 2-3 недели до и после отела у коров в сыворотке крови противовирусные антитела в РИД не обнаруживают. В этот период высокий титр антинел регистрируют в молозиве и молоке инфицированных коров.

Мурватуллаев С. А. (1994) пришел к заключению, что выпадение серологических реакций при лейкозе крупного рогатого скота часто встречается. Могут отсутствовать линии преципитации как к гликопротеидному, так и к полипептидному антигенам вируса лейкоза, причем первому из них линия преципитации часто восстанавливается, а спустя некоторое время может вновь исчезать. Линия к полипептидному -24 антигену вируса лейкоза не восстанавливается. Связи между выпадени­ем реакции и беременностью, отелом, сроком стельности не уста­новлено. Существует закономерность между уменьшением (увеличением) числа лейкоцитов и выпадением (восстановлением) серологического ответа больного лейкозом животного [13].

Частое выпадение серологической реакции у больного животного свидетельствует о необходимости сокращения сроков диагностического исследования в неблагополучных стадах с 90- до 30-45 дней для своевременного выявления и изолирования источника инфекции.

Согласно действующей инструкции, исследование сыворотки крови в РИД запрещено повторное ее переисследование при положительном ее результате.

Кроме РИД, были предложены и другие серологические реакции (реакция связывание комплемента, реакция иммуннофлюоресценции, реакция радиоиммуннопреципитации, реакция нейтрализации), но широкого приме­нения они не нашли [12].

ИФА – высокочувствительный диагностический тест. С его помощью выявляют антитела не только в сыворотке крови, но и в других биологических жидкостях (молоко). Это очень важно, так как этот метод позволяет оценить эпизоотическое состояние стада по пробе молока. Благодаря высокой чувствительности, быстрой постановке реакции этот современный метод можно использовать для выявления вирусоносительства на последних стадиях оздоровления неблагополучных стад [8].

В последние годы всё более широкое применение находят молекулярно-биологические исследования с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Этот метод обладает высокой специфичностью и позволяет выявить инфицированных животных на более ранних стадиях заражения. ПЦР-диагностику нельзя пока рассматривать в качестве массового метода исследования при лейкозе, она может использоваться наряду с серологическими методами преимущественно в племенных хозяйствах на завершающей стадии оздоровления [14].

Посмертная диагностика лейкоза крупного рогатого скота состоит из гистологического исследования и патологоанатомического вскры­тия. Патологоанатомическая диагностика основана на обнаружении в кроветворных органах изменений, являющихся следствием избыточного разрастания ткани. Патологоанатомические изменения лейкозного ха­рактера регистрируют при вынужденном убое животных с клиническими признаками лейкоза. При гематологической стадии лейкоза патологоанатомические изменения у крупного рогатого скота устанавливают не у всех животных.

Наиболее частой формой лейкоза крупного рогатого скота являются лимфоидные лейкозы и лимфосаркомы (гематосаркомы). Ряд исследовате­лей описали миелоидные формы лейкоза и лимфогрануломатоз.

В соответствии с действующей инструкцией по профилактике и оздоровлению крупного рогатого скота от лейкоза диагноз на лейкоз считается установленным при наличии одного из таких показателей [7]:

1. Положительного результата серологического исследования по РИД;

2. Характерных патологоанатомических признаков заболевания;

3. Положительного результата гистологического исследования патологи­ческого материала.

Основным методом прижизненной диагностики лейкоза является серологический - реакция иммуннодиффузии в агаровом геле. Гематологический и клинический методы исследования используются для установления стадии полного разви­тия заболевания у серопозитивных животных. Патологоанатомические исследования устанавливают степень поражения органов, а гистологи­ческим - морфологические формы лейкоза.

При выявлении у крупного рогатого скота изменений белой крови необходимо провести дифференциально-диагностические исследования, исходя из того, что подобные нарушения возможны при некоторых инфекционных и незаразных болезнях. Следует отметить, что дифференциальную диагностику легче осуществлять в тех хозяйствах, где ветеринарные специалисты вооружены многолетними знаниями эпизоотической ситуации и анамнестическими данными о характере преобладающих незаразных болезней крупного рогатого скота.

К числу хронических заразных болезней крупного рогатого скота, при которых наблюдаются изменения крови, требующие дифференциации с целью исключения лейкоза, относится туберкулез, паратуберкулезный энтерит, бруцеллез, актиномикоз, бабезиоз, фасциолез и др.

Дифференциация туберкулеза достигается прежде всего аллергическими, бактериологическими, серологическими (РИД) и патологоморфологическими исследованиями. При туберкулезе наблюдаются лей­коцитозы или лейкопении, сопровождающиеся нейтрофилией. При благо­приятном течении туберкулеза отмечают умеренный непродолжительный лимфоцитоз [7].

При бруцеллезе, сопровождающемся гнойно-некротическими процессами, регистрируют нейтрофилию со сдвигом лейкоцитарной форму­лы влево. Чаще всего у крупного рогатого скота протекает с нормаль­ными показателями белой крови. При дифференциальном диагнозе учи­тывают данные эпизоотологии и результаты серологических исследо­ваний на лейкоз и бруцеллез [7].

При паратуберкулезе могут наблюдаться лейкопении и лимфопении [7].

Актиномикоз исключают клиническим исследованием. Лимфоузлы (под­челюстные, в области глотки, гортани и реже вентральной части шеи) при актиномикозе характеризуются плотностью пораженной ткани, флюктуацией, абсцедированием с образованием фистулезных ходов на раз­резе [7].

Из незаразных заболеваний от лейкоза крупного рогатого скота следует дифференцировать маститы, пневмании, ретикулоперикардиты, эндометриты, болезни печени и прочие [7].

Хронические заболевания без гнойно-воспалителъных проявлений сопровождаются в большинстве случаев нормальными показателями периферической крови, иногда наблюдаются повышенные количества лейкоцитов и изменения в лейкоцитарной формуле с наличием эозинофилии, нейтрофилии или моноцитоза. В редких случаях при одновременном сочетании двух или более хронических заболеваний нелейкозной природы у животных может отмечаться умеренный лимфоцитоз при нормальном или повышенном количестве лейкоцитов [7].

Также лейкозы следует дифференцировать между собой: гемацитобластоз, миелолейкоз, лимфолейкоз, гематосаркомы, злокачественный гистиоцитоз, лимфосаркоматоз, ретикулосаркоматоз, лимфогранулематоз. Эти формы можно различать при исследовании мазков крови: лейкоцитарная формула и степень зрелости клеток переферической крови [7].

В практике нередко приходится дифференцировать лейкоз от опухолей, которые макроскопически (отдельные или мужественные узлы) или микроскопически (диффузная или тотальная пролиферация клеток, сгла­живание структуры тканей органов) имеют сходство с лейкозом (Лемеш В. М. и др. 1987 г).

Чаще всего в таких случаях диагностируются опухоли из волокнистой соединительной ткани, железистого эпителия, нейрофибромы.

2.7. Иммунитет и иммунизация.

В последние годы в Украине разработаны методы борьбы с лейкозом – это применение вакцин таких как: «Лейкопол» - имеющая высокую профилактическую эффективность в случае вакцинации серонегативных животных.

Вакцина «Лейкозав» - обладающая высокой профилактической эффективность, вакцинация лечебной дозой обладает выраженным лечебным эффектом. При вакцинации только коров, телятам передается коллостральный иммунитет [13].

В 1994 году – вакцина «Лейкопол» была рекомендована Государственным Департаментом ветмедицины для широкого производственного опробования, а позднее широкого применения в практике ветмедицины. «Лейкопол» - адсорброваная инактивированная вакцина против лейкоза крупного рогатого скота [18]. Вакцину вводят животным внутримышечно три раза с интервалом 14 дней. В крови иммуннизированых животных появляются противовирусные антитела, которые обеспечивают резистентность животного от лейкоза почти два года [3].

В 2000-2002 годах была испытана противлейкозная вакцина «Лейкозав». По данным ее автора академика Заверюха А. И. вакцина обладает лечебным эффектом и после двукратной прививки до 70% РИД+ животных становятся РИД(-), то есть приобретают иммунитет. Однако испытание данной вакцины в 4х хозяйствах Сватовского района с инфицированностью маточного поголовья 52-84% положительного эффекта не дало, так как серонегативными стали только 0,7-30,5% РИД+ коров, а весь привитый молодняк в них был сдан на убой по хозяйственным причинам. Эта вакцина было запрещено применять приказом Департамента ветмедицины №78 от 23.12.2002 года, так как требуется доработка [19].

2.8. Лечебно-профилактические мероприятия, меры борьбы.

Лечение не эффективно. Заболевание прогрессирует и пораженость стада КРС по Украине составляет приблизительно 67% [16]. Поэтому оздоровление животноводческих хозяйств от лейкоза крупного рогатого скота является одним из приоритетных направлений в системе профилактики и мер борьбы с инфекционными болезнями животных [4]. В 1987 году по инициативе и под руководством академика ВО Бусола была создана Научно-производственная система «Орион» и ее Ровненское отделение, которое работает при институте эпизоотологии УААН и обеспечивает научное борьбе с лейкозом в Украине [21].

В настоящее время в Украине мероприятия по борьбе с лейкозом проводят согласно действующей инструкцией, которая утверждена Государственным Департаментом ветеринарной медицины в 1992 году. [9,31]. На всех стадиях ВЛКРС – инфекции животное выделяет вирус, поэтому принцип борьбы с лейкозом заключается в своевременном выявлении инфицированных и больных особей и их изоляции. Серологическая (РИД) диагностика лейкоза помогает выявлять инфицированный ВЛКРС скот. В стадах до 10% таких животных рекомендуют сдавать на убой; с инфицированностью до 30% и выше серопозитивных особей старше 2 лет исследуют гематологически [5].

Мероприятия по борьбе с лейкозом крупного рогатого скота включают постоянный клинический контроль за состоянием животных; проведения гематологических и серологических (РИД) исследований.

Ликвидация лейкоза среди поголовья КРС в неблагополучных хозяйствах проводить целесообразно с применением 3х основных методов:

1.  полной сменой неблагополучных групп животных здоровым поголовьем. В хозяйствах с высокой инфецированостью поголовья (более 50%) и с двойной инфекцией;

2.  проведение регулярных серологических исследований поголовья животных с последующей сдачей РИД(+) (в хозяйствах с инфицированностью от 3 до 50%);

3.  стадо разделяют на РИД (+) И РИД(-) группы. С постепенной заменой РИД(+) животных. [32].

Согласно с планом противоэпизоотических мероприятий, разработанном в институте эпизоотологии УААН в 2002 году животных разделяют на две группы серонегативные и серопозитивные, которые содержат в разных помещениях. Телочек от здоровых и больных коров на протяжении 7 дней выпаивают молозивом и молоком, а в дальнейшем содержат в индивидуальных и групповым клетках изолированно от коров и выпаивают пастеризованным молоком. Серонегативных животных после разделения стада на здоровых и больных дважды исследуют через 10 дней, а в дальнейшем – через 30-45 дней.

Также животных исследуют гематологически. Коров с подтвержденным гематологически диагнозом в течении 15 дней сдают на убой.

В Украине были разработаны и другие методы борьбы с лейкозом, в которых предусмотрено применение вакцин [24].

Заключительный этап в оздоровлевании поголовья скота от лейкоза в хозяйствах с остатком РИД+ коров до 50% связан с решением следующих задач:

1.  В условиях РИД(-) группы необходимо дубится двух подряд отрицательных результатов при исследовании поголовья через каждые 30-45 дней.

2.  Поэтапная замена изолированно передерживаемого остатка РИД+ коров здоровыми серонегативными нетелями, выращиваемыми в оздоравливаемом хозяйстве или закупленными в благополучных хозяйствах[15].

Ветеринарно-санитарная экспертиза:

При поражении мышц или лимфоузлов туши, а также нескольких паренхиматозных органов, или при выявлении лейкозных разрастаний (бляшек) на серозных покровах туши, независимо от упитанности, и все другие продукты убоя утилизируют. Если нет изменений в скелетной мускулатуре, а поражены лишь отдельные лимфоузлы или органы, то их направляют на утилизацию, а тушу и непораженные органы используют в зависимости от результатов бактериологического исследования. При обнаружении сальмонелл тушу, и непораженные органы направляют на проварку или изготовление консервов. Если сальмонелл нет, то тушу и непораженные органы направляют на изготовление колбасных изделий.

При положительном результате гематологического исследования животного на лейкоз, но при отсутствии патологоанатомических изменений, тушу, и органы выпускают без ограничений. После убоя помещение и оборудование дезинфицируют; вначале обильно орошая 2%-ным раствором едкого натрия (70-800С), затем тщательно моют горячей водой и вновь орошают 4%-ным горячим раствором едкого натрия или раствором извести с 2% активного хлора. После часового проветривания помещения обмывают горячей водой. Инструменты обеззараживают 2%-ным раствором едкого натрия (70-800С) или раствором хлорной извести с содержанием 2% активного хлора [6].

Согласно законодательству молоко от клинически больных коров даже после термического обеззараживания запрещается скармливать животным. Такое молоко подвергается утилизации после обработки формалином, щелочью, фенолом или другими дезинфицирующими средствами [19].

3.Собственные исследования

ООО "Агрофирма имени Крупской" располагается в селе Михайловка Нижнегорского района в северной части полуострова Крым и занимает 1700 га полезной площади. ООО «Агрофирма имени Крупской» граничит со следующими хозяйствами: на севере ООО "Содружество", на востоке совхоз "Нижнегорский плодопитомник", на юге КСП «Большевик»

На территории климат засушливый с жарким летом и умеренно - мягкой зимой. Среднегодовая температура воздуха 10,3°С, самые теплые месяцы - июль, август; холодные - январь, февраль. Зимой дуют северо­восточные ветры, летом - юга-западные, среднегодовое количество осадков составляет 371мм. Основное направление производства — растениеводство. В хозяйстве выращивают в основном зерновые культуры (пшеница, ячмень).

Животноводство занимает второстепенное значение и представлено скотоводством, коневодством и свиноводством. Продукция животноводства, в частности молоко, поступает на молокозавод ООО "Новатор" г, Джанкоя; мясо реализуется в пределах хозяйства, на Азовский колбасный цех; шкуры - частным предпринимателям.

В состав хозяйства входит молочно-товарная ферма, конюшня и свиноферма. Поголовье скота составляет 159 головы КРС: в т. ч. коров - 56 гол. нетелей - 29 гол. молодняк -74 гол. Свиней - 221 голов. Лошади-61 гол.

Среднегодовой удой на фуражную корову за 2007 год - 3351 кг. На 100 коров за 2007 год получено 96 телят. Масса теленка при рождении в среднем составляет 35 кг.

В ООО "Агрофирма имени Крупской" заготавливается необходимое количество хорошего качества грубых и сочных, концентрированных кормов. Все корма хозяйство выращивает самостоятельно.

Территория фермы ограждена забором. При въезде на территорию фермы, возле ворот для дезинфекции колес транспорта на всю их ширину оборудован цементный кювет, который очень редко заполняют раствором хлорной извести. Дезинфекционные коврики отсутствуют, имеются дезинфекционные барьеры, но они не функционируют.

Кроме основных животноводческих корпусов на территории расположены вспомогательные помещения хозяйственного назначения: склады, кормохранилища и другие. Территория фермы круглосуточно охраняется. На ферму посторонним вход и въезд транспорта запрещен.

Имеется 2 функционирующих типовых коровника. Коровы содержаться на привязи, в хорошую погоду им обеспечивают моцион в выгульных дворах. Раздача кормов механизирована, навоз удаляется скребковым транспортером. Доение коров осуществляют в стойлах вакуумной трехтактной доильной установкой.

В коровник рассчитан на 100 голов крс. Он четырехрядный. Каждые два ряда соединены общим кормовым проходом, его ширина 2,5 метра. На две коровы приходится одна автопоилка. В коровниках придерживается температура воздуха зимой 8°С, относительная влажность 80%, количество вытяжных каналов 4. Окна с одинарными стеклами, с внутренней стороны оббиты пленкой, в результате чего естественное освещение недостаточное. Искусственное освещение также недостаточно из-за малого количества электроламп. Полы в стойлах деревянные на бетонной основе. Навоз по мере накопления вывозится на навозохранилище. В коровниках подстилку не используют, в основном ее применяют в виде соломы при содержании телят
(до 3-х месячного возраста). Помещение для молодняка по размеру такое же, как коровники, с той разницей, что по средине его расположены групповые клетки, содержащие до 10 голов в каждой. Освещение, вентиляция здесь не достаточны. Кормление, поение, уборка навоза не механизированы.

В хозяйстве водоснабжение централизованное, то есть вода подается к месту ее потребления. Водопровод напорный со специальной водонапорной башней. Поение водой автоматическое только в коровниках: в помещениях, где содержали молодняк, поение ручное; температура воды для поения в пределах 9-10 °С, для молодняка воду подогревают в специальных котлах, доведя ее до температуры 15°С. Кормление сухостойных и дойных коров не отличаются. В состав рациона на одну голову в сутки приходится: 2 кг соломы ячменной, 3 кг дерти ячменной, 1 кг жмыха подсолнечного, 27 кг злакобобовой смеси. В летнее время максимально используют зеленные корма. Коров выпасают.

В хозяйстве работает один ветеринарный врач и один ветеринарный фельдшер.

На территории фермы имеется пункт искусственого осеменения, убойный пункт. Как таковых карантинных помещений на территории фермы не имеется, так как хозяйство не приобретает животных извне.

В животноводческих помещениях в последний день месяца проводится санитарный день: после механической очистки помещений стены и кормушки белят 20%-м раствором свежегашеной извести, либо проводят обработку помещений 3%-м горячим раствором каустической соды.

На расстоянии 1 км от МТФ находится навозохранилище открытого типа, полу—углубленное глубиной 2м, шириной 20м. Дно и стены навозохранилища бетонированы. Навоз вывозят туда по мере накопления тракторных прицепов, не соблюдая определенный срок выдержки на ферме(14 дн).

На территории МТФ постоянно проводится профилактические дезинсекция и дератизация.

Б хозяйстве имеется биотермическая яма, куда перевозят трупы на тракторе в телеге, предварительно поместив труп в пакет из толстого полиэтилена.

Комплектования поголовья КРС осуществляется за счет собственного воспроизводства животных. Туши говядины хозяйство реализует на Азовский колбасный цех. Молоко от всех коров после доения фильтруется; из методов ветсанэкспертизы подвергается определению плотности, сливается в цистерны молоковоза и отправляется на молокозавод ООО "Новатор" г. Джанкоя.

Хозяйство на протяжении ряда лет неблагополучно по лейкозу КРС, С выявлением больных животных до 8% и более. В октябре 2008 года все серопозитивные лейкозные коровы были сданы на мясокомбинат (48 голов). По другим инфекционным, а также инвазионным заболеваниям является благополучным.

Ветеринарно-санитарные мероприятия проводятся согласно плану противоэпизоотических мероприятий. Дойное стадо исследуется один раз в год на туберкулез, лейкоз и бруцеллез. Выборочно — на фасциолез, диктиокаулез, мониезиоз, гиподерматоз. С трехмесячного возраста все поголовье подвергают вакцинации против сибирской язвы,; молодняк допрививают согласно инструкции. Свиней вакцинируют против чумы. Проводят выборочно диагностические исследования (серологические исследования крови) на бруцеллез, лептоспироз аскаридоз. Лошадей вакцинируют против сибирской язвы, обрабатывают против параскаридоза.

На СТФ все профилактические дезинфекции, дезинсекции осуществляются с помощью дезинфицирующей техники (ДУК). В качестве дезинфектантов используются; 5% и 20% растворы хлорной извести, 2% раствор каустической соды, формалин, 2-3% горячий раствор едкого натра, раствор виркона.

Профилактическая дезинфекция проводиться два раза в год: I раз после выгона животных в летние лагеря, а II раз перед загоном на зимнее время в коровники.

План специальных и организационно – хозяйственных мероприятий по оздоровлению крупного рогатого скота от лейкоза в ООО «Агрофирма имени Крупской» на 2009 год.

При анализе плана специальных и организационно – хозяйственных мероприятий по оздоровлению крупного рогатого скота от лейкоза в ООО «Агрофирма имени Крупской» можно сделать вывод, что не все его пункты выполняются в полном объёме. При получении положительных результатов РИД, животные изолируются в отдельное помещение. Это не приводит к перезаражению здоровых животных. Диагностические исследования проводятся не всегда регулярно. Не всегда диагностики подвергается молодняк. Не своевременно осуществлялась дезинфекция помещений, а в настоящее время, в связи с недостаточностью материальных средств, она проводится только в телятнике. Дойку у РИД – позитивных и РИД – негативных коров проводят одним доильным аппаратом. Молоко сдают на молокозавод без предварительной пастеризации в хозяйстве. Телят выпаивают не обеззараженным молоком, а молодняк полученный от РИД – положительных и РИД – отрицательных животных содержится в одном помещении.

4. Заключение

На основании полученных данных можно сделать вывод, что хозяйство на протяжении ряда лет неблагополучно по лейкозу КРС, с выявлением больных животных до 8% и более. А по другим инфекционным, а также инвазионным заболеваниям является благополучным. Так как диагностические исследования проводятся не всегда регулярно. Не всегда диагностики подвергается молодняк. Не своевременно осуществлялась дезинфекция помещений,

5. ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1.  Серологическое исследование серонегативных животных старше 4 – 6 месячного возраста проводить систематически с интервалом 30 – 45 дней;

2.  серопрзитивных животных старше двух лет исследовать клинико – гематологически в течении 15 дней после разделения стада, а далее один раз в год;

3.  животных с гематологическими признаками лейкоза в течении 15 дней после их выявления сдавать на убой;

4.  молоко от серопозитивных животных пастеризовать в хозяйстве при температуре 80 С, после чего его можно сдавать на молокозавод либо использовать для кормления телятам;

5.  молоко от гематологически больных коров уничтожать путём добавления к нему 5 % формальдегида.

6.  телят до 7 дневного возраста выпаивать материнским молоком, а далее пастеризовать и содержать на отдельной ферме.

7.  проводить дезинфекцию животноводческих помещений после каждого взятия крови и изоляции больных животных;

8.  отёл РИД – позитивных коров проводить в отдельном помещении;

9.  выделить для доения РИД – положительных коров отдельные аппараты;

10.  соблюдать правила асептики и антисептики при зооветмероприятиях.

4. СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Аминева С. П., Глобенко Л. А., Петров В. Н. и др. Использование моноклональных антител для диагностики лейкоза КРС. //Материалы международной конференции// Харьков, 1995 г. с. 240 – 243.

2. Андриян Е. А., Цымбал В. И., Ененко Н. Г. Эпизоотологическая роль машинного доения в распространении лейкоза крупного рогатого скота. //Материалы международной научной конференции.// Харьков, 1995 г. с. 162 – 164.

3. Аранчiй В., Русанова Г., Товма И., Нагаєва Л., Аранчiй С. єкономiчна ефективнiсть оздоровчих заходiв iз застосуванням вакцини проти лейкозу великоï рогатоï худоби., ж Ветеринарна Медицина Украïни, № 6, 1997 р., с 17.

4. Белов А. Д., Рогожина Л. В., Сноз Г. В. О патогенезе лейкозов крупного рогатого скота., ж Ветеринария, № 12, 1997 г., с. 16 – 19.

5. Галатюк О., Романишина Т., Жилiхiвський А. Эпiзоотологiчний монiторинг та проведення оздоровчих заходiв при лейкозi великоï рогатоï худоби Житомирськiй облостi // Ветеринарна медицина Украïни.- 2006. - №6 с.10-11.

6. Алiмов П. В. Оздоровлення господарств агрокомплексу ВАТ ММК iм. Iллiча в iд лейкозу великоï рогатоï худоби // Ветеринарна медицина Украïни.- 2007.-№11. с.10.

7. Бусол В. А. , Цымбал В. И., Ковалюшко В. С. Организация научно – обоснованных противолейкозных мероприятий в неблагополучных хозяйствах Украины. //Материалы международной научной конференции.// Харьков, 1995. С. 43 – 45.

8. Донник И. М., Татарчук А. Т. лейкоз крупного рогатого скота в экологически неблагополучных районах Урала //Материалы международной конференции// Харьков, 1995 г. с. 134 – 137.

9. Коромыслов Г. Ф., Бурба Г. Л., Нахмансон В. М. Основы профилактики и ликвидации лейкоза КРС., ж. Ветеринария, № 4, 1993 г., с. 7

10. Кузин А. И., Закрепина Е. Н. влияние лейкоза на продуктивность коров и качество молока., ж. Ветеринария, № 2, 1997 г., с. 19 - 21.

11. Кузнецова Н. В.,Кузнецов Н. В., Симонян Г. А. Использования полимеразной цепной реакции для выявления инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота., ж. Ветеринария, № 5, 1997 г. с. 12 – 15.

12. Малоголовкин С. А. Роль моноклональных антител в диагностике лейкоза крупного рогатого скота. , ж. Ветеринария, № 4, 1997 г., с. 16 – 19.

13. Мандыгра Н. С. Диагностическая ценность реакции диффузной преципитации ( РДП ) при лейкозе крупного рогатого скота. //Материалы международной научной конференции// Харьков, 1995 г. С. 243 – 245.

14. Мандигра М. Наукова – виробнича система « Орiон » у боротьбi з лейкозом великоï рогатоï худоби., ж. Ветеринарна медицина., квiтень 1998 р. с. 22 – 23.

15. Мандыгра Н. С. Эпизоотический процесс и эпизоотологическая эффективность мероприятий по борьбе с лейкозом крупного рогатого скота. //Материалы международной научной конференции// Харьков,1995. С. 20 – 23.

16. Мандигра М. С. єпiзоотологiчний монiторинг, профiлактика та системи лiквiдацiï лейкозу великоï рогатоï худоби в Украïнi., Автореферат дисертацiï на здобуття наукового ступеня доктора ветеринарних наук. Харкiв – 2000, 36 с.

17. Маринин Е. А., Кузнецов А. П. Прогнозирования сроков оздоровления хозяйств от лейкоза крупного рогатог скота., ж. Ветеринария, № 6, 1997 г. с. 17 – 20.

18. Нагаєва Л., Горжеєв В., Павленко М. та iн. Результати застосування у широкому виробничому дослiдi в системi чинних протилейкозних заходiв вакцини проти лейкозу великоï рогатоï худоби., ж. Ветеринарна медицина. травень 1998 р. с. 19 – 22.

19. Нагаева Л. И., Ковалюшко В. С., Прискока В. А. и др. Результаты исследования вакцины против лейкоза крупного рогатого скота. //Материалы международной научной конференции// Харьков, 1995 г.,с. 401 – 403. .

20. Нагаева Л. И., Цымбал В. И., Аранчий С. В. и др. Научно-производственное внедрение вакцины против лейкоза крупного рогатого скота в комплеке мероприятий по оздоровлению от лейкоза крупного рогатого скота. //Материалы международной научной конференции// Харьков, 1995 с. 404 – 497.

21. Ярчук Б., Тирсiн Р., Довгань О. Сучаснi аспекти дiагностики та заходiв боротьби з лейкозом великоï рогатоï худоби // Ветеринарна медицина Украïни.- 2006.- №9 с. 21-23.

22. Козаченко О. I., Блаженко А. П., Коваленко Л. В. Iєрархiя iнфекцiйного процессу при лейкозi великоï рогатоï худоби // Ветеринарна медицина Украïни.- 2006.- №3 с.29-30.

23. Петров Н. И. Оздоровление хозяйств против лейкоза крупного рогатого скота., ж. Ветеринария, № 9, 1997 г., с. 10.

24. Смирнов Ю. Влияние лейкоза на молочную продуктивность коров., ж. Молочное и мясное скотоводство., № 4, 1999 г. с. 23 – 25.

25. Смирнов Ю. П. Эффективность противолейкозных мероприятий в зависимости от кратности и интервалов серологических исследований., ж. Ветеринария, № 11, 1991 г. с. 29 – 30.

26. Снежков Н. И., Гулюкин М. И., Бурба Л. Г.и др. Биологические свойства молока и его роль в распространении возбудителя лейкоза крупного рогатого скота. ж., Ветеринария, № 11 1991 г. с. 30 – 34.

27. Вирусные болезни животных / В. Н. Сюрин, А. Я. Самуйленко, Б. В. Соловьёв, Н. В. Фомина / .- М. : ВНИТИБП, 1998. – С. 383- 406.

28. Тирсiн Р., Ярчук Б., Довгаль О. Вплив бiотичних факторiв на особливостi розвитку лейкозного процесу., ж. Ветеринарна медицина, № 6 1996 р., с. 17.

29. Хисамутдинов Ф. Ф. Племенной молодняк – источник вируса лейкоза крупного рогатого скота., ж. Ветеринария, № 3, 1996 г. с. 11.

30. Гулюкiн М. Т. Методи дiагностики лейкозу великоï рогатоï худоби та ïх оцiнка в системi протиепiзоотичних заходiв у Росiйськiй федерацii // ветеринарна медицина Украïни. – 2006. - №3 с.20-21.

31. Ярчук Б. М. , Домбровський О. Б., Тирсiн Р. В. та iн. Закономiрностi розвитку iнфекцiйного процесу при лейкозi в одновiковiй групi РiД – позитивних корiв з рiзним строком тiльностi. //Материалы международной научной конференции// Харьков, 1995 г. с. 662 – 664.

32. Инструкция по профилактике и оздоровлению крупного рогатого скота от лейкоза. Киев 1992 8 с.