ДИПЛОМНАЯ РАБОТА На тему: «Мероприятия по профилактике и оздоровлению крупного рогатого скота от лейкоза в СООО «Нива» Тельмановского района Донецкой области» 2008

Содержание

ВВЕДЕНИЕ.....................................................................................

І. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ..................................................................

1.1  Определение болезни, распространение...........................

1.2  Этиология и патогенез........................................................

1.3  Эпизоотология...........................................................

1.4  Клиническая картина...............................................

1.5  Диагностика..........................................................

1.6  Профилактика, и меры оздоровления неблагополучного хозяйства.....................................................................

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ....................................

2.1 Цели и задачи исследований……………………………………

2.2. Материалы и методы исследования.............................

2.3 Показатели развития животноводства и состояние ветеринарной работы хозяйства.....................................

2.3. Результаты собственных исследований и их об

2.4. Ветеринарная экология...........................................

2.5 Экономическое обоснование полученных результатов

3. ВЫВОДЫ………………………………………………......

4. ПРЕДЛОЖЕНИЯ………………………………………………..

5. Список использованной литературы.......................................

ВВЕДЕНИЕ.

Одной из актуальных проблем в молочном животноводстве является лейкоз крупного рогатого скота, распространение которого в известной степени отражается на производстве продуктов животноводства и их качества. В связи с тем, что лечение и вакцинопрофилактика в настоящее время в достаточной мере не разработана, успех борьбы с этой инфекцией зависит исключительно от выяснения и своевременного перерыва путём передачи вируса от больных и инфицированных животных к здоровым.

Экономический ущерб наносимый лейкозом животноводству достигает значительных размеров в следствии падежа, вынужденной выбраковки, снижения продуктивности больных животных, утилизацией туш и органов с лейкозными поражениями, недополучением молодняка, затрат по обеззараживанию молока и нарушения племенной работы.

Эпизоотическая ситуация по лейкозу крупного рогатого скота на Украине достаточно сложная. В период с 1980-1997 гг. на каждые 100 тыс. исследованных ежегодно было диагностировано от 349,25 до 7639,32 гематологически больных животных и от 28,0 до 83,87 туш с изменениями, характерными для лейкоза крупного рогатого скота. Инфицированность животных на Украине на начало внедрения серологической диагностики (1986 г.) составила 18,6 %. В хозяйствах Днепропетровской, Донецкой, Запорожской, Луганской, Полтавской, Тернопольской, Харьковской и Черкасской областей она была выше 20 %, а в Закарпатской, Львовской, Ивано-Франковской, Сумской – до 10 %.

В 1991 году по сравнению с 1986 годом показатель поражённости вирусом уменьшился в 1,8 раза, в 1995 году – 2,6, в 1998 году – 2,9 раза. Наибольшее распространение лейкозной инфекции в последние годы исследований было выявлено в Занорожской, Харьковской Херсонской, Кировоградской, Днепропетровской областях и в Автономной Республики Крым.[16]

Проходя производственную практику в СООО «Нива» Тельмановского района Донецкой области, я принимал непосредственное участие в мероприятиях по профилактики и оздоровлению крупного рогатого скота от лейкоза.

І. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Определение болезни, распространение

Лейкоз животных – преимущественно медленно протекающая, неизлечимое заболевание, особенностью которого является гиперпластическое опухолевое поражение лейкопоэтической ткани, как в органах физиологического кроветворения (костный мозг, селезёнка, печень, лимфатические узлы), так и в других органах и тканях, где кроветворные клетки находятся в ассоциации с различными компонентами соединительной ткани.

При этой болезни возникают прогрессирующие нарушения кроветворения, проявляющиеся усиленной выработкой форменных элементов крови, лишённых в той или иной степени дифференцировки и физиологического созревания. Кроме того, признаками лейкозных клеток являются атипия формы ядра, появление ядерных карманов, продукции вирусов. [6]

1.2. Этиология и патогенез.

В 1969 г. в культурах лимфацитов больной лейкозом коровы выявили онковирус типа С. Затем многоплановыми исследованиями результаты подтвердили. Возбудетель классифицировали как вирус лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС). Это РНК - содержащий, экзогенный вирус семейства Retroviridae, подсемействa – Oncornoviridae, представители которого обладают онкогенными свойствами. Отличительный признак возбудителей этого семейства – наличие в вирионе фермента ревертазы – обратной транскриптазы (РНК - зависимой ДНК - полимеразы). Зрелые вирионы ВЛКРС состоят из центрально расположенного электронно - плотного нуклеотида. Внешняя оболочка возбудителя представлена двухконтурной мембраной, на поверхности которой выявляют шипики с пуговкоподобными утолщениями на концах.

,При изучении нуклеотидных последовательностей и структуры геномов ВЛКРС и других ретровирусов было установлено, что ВЛКРС наиболее тесно связан с вирусом Т-клеточного лейкоза человека, который также относится к вирусам типа С. Электрофоретический анализ полипептидного состава белков показал, что вирионы содержат следующие мажорные полипептиды: низкомолекулярные белки р10, р12, р15 и р 24, основной внутренний белок р24 и два гликопротеида - gp30 и gp51.

Изучение иммунологической специфичности белков ВЛКРС показало, что р15, р24, gp51 и фермент ревертаза, не содержат общих антигенных детерминант с вирионными белками других онковирусов животных. [12]

ВЛКРС – внутриклеточный паразит, обладающим тропизмом. Его находят лишь в лимфоцитах в форме провируса, интегрированного в геном клетки. Он обладает агглютинирующими свойствами по отношению к эритроцитам мышей, но не агглютинирует эритроциты других видов животных и человека. Возбудитель чувствителен к высокой температуре, пастеризация молока при температуре 74 С (40 минут) разрушает его и он теряет инфекционность. В жидком азоте вирус сохраняет жизнеспособность годами.

Лейкоз КРС обычно диагностируется на поздних стадиях, при распространении процесса на весь организм. Поэтому многие исследователи лейкоз характеризуют как системное заболевание кроветворных органов. На этой основе и строится патогенез. Однако в последнее время появились данные, позволяющие пересмотреть представление о системном возникновении лейкозов. Существует мнение, что на предрасположенность к лейкозам и на течение болезни оказывает влияние эндокринная система. Основной, характерной чертой лейкозных и опухолевых клеток является неспособность к правильной дифференциации и созреванию. При нормальном гемопоэзе кроветворные клетки, созревая, теряют способность к делению, тем самым дифференциация является как бы физиологическим тормозом пролиферации. Лейкозные клетки могут проходить значительно больше циклов деления, чем нормальные клетки крови, что создаёт огромную клеточную продукцию характеризующую лейкоз. Развиваются изменения, ведущие к нарастающей малигнизации в организме. Причём, лейкозные изменения начинают проявляться в костном мозге, светлых центрах фолликулов и синусов лимфатических узлов головы и шеи, а затем переходят на все наружные и внутренние лимфоузлы с вовлечением в патологический процесс других органов и тканей. Поэтому лейкоз относят к системным заболеваниям.

Однако лейкозный процесс может начаться с поражения лимфоузлов средостения, брюшной полости и т. д. Поэтому становится очевидным, что в развитии болезни кроме обязательного присутствия ВЛКРС имеет важное значение состояние желёз внутренней секреции, а также контролирующих систем подавляющих лейкозогенную информацию в клетке. [4]

1.3 Эпизоотология

Цитотропность возбудителя лейкоза, способность размножаться только в клетках крови обуславливают пути выделения его из организма во внешнюю среду и непосредственной передачи плоду или восприимчивому животному.

Особенность взаимодействия вируса с макроорганизмом на уровне генетического аппарата клетки обуславливает пожизненное пребывание его в организме КРС. Медленное течение лейкозной инфекции определяет разную эпизоотологическую значимость заражённых животных. Самым интенсивным источником возбудителя инфекции является больное животное. Не менее опасным источником вируса лейкоза может быть скот, у которого инфекционный процесс протекает скрыто.

Механизм передачи вируса лейкоза по данным Бусола В. А. (1995) обусловлен эволюционно сложившейся биологической приспособленностью возбудителя инфекции паразитировать в клетках крови, нарушать генетический аппарат их и превращать клетки в злокачественные. При лейкозе, в отличии от большинства инфекционных болезней, в организме животного не происходит иммунологическая перестройка, создающая неблагоприятные условия для дальнейшей жизнедеятельности вируса и лейкозных клеток. В связи с этим поражённый вирусом лейкоза организм потенциально обречён на гибель. При таком исходе инфекции, если бы не происходила постоянная смена животных-хозяев, не сохранялся бы онкогенный вирус. Вследствие существования эффективного механизма передачи вирус циркулирует в популяции КРС.

Известны два пути передачи возбудителя болезни – вертикальный или внутриутробное заражение и горизонтальный, когда вирус от больных и инфицированных животных передаётся здоровым. В эпизоотологическом процессе лейкоза главную роль играет горизонтальный путь; вертикальный путь заражения встречается довольно редко – в 2 –3 случаях. Вирус передаётся от матери плоду трансплацентарно, во время последних 6 месяцев внутриутробной жизни, а не через половые клетки [22].

Источником возбудителя инфекции при лейкозе крупного рогатого скота являются заражённые животные, из организма которых вирус выделяется со всеми секретами и экскретами, которые содержат лейкоциты. В естественных условиях ВЛКРС поражает только крупный рогатый скот. Экзогенность возбудителя доказали обнаружением его последовательностей только в лимфоцитах больных лейкозом животных и отсутствием их у здоровых особей того же вида, а также эпизоотологическими исследованиями, показавшими, что вирус передают больные лейкозом или находящиеся в состоянии скрытой (бессимптомной) инфекции животные. Заражение здоровых животных происходит, в основном, при парентеральном проникновении возбудителя. Для заражения коровы достаточно ввести внутрикожно 2500 лимфоцитов крови (это количество лимфоцитов содержится примерно в 0,0005 мл цельной крови). Учитывая возможность переноса ВЛКРС ничтожным количеством крови, следует иметь в виду, что при несоблюдении элементарных санитарных правил инфекция может распространяться во время выполнения ветеринарных процедур со шприцами, иглами и другими хирургическими инструментами, контаминированными кровью. Следовательно, при массовом взятии крови, вакцинации, туберкулинизации и других мероприятий для каждого животного необходимо использовать отдельный стерильный инструмент. [15] Несоблюдение этого правила резко повышает инфицированность животных неблагополучных хозяйств. Имеются косвенные доказательства того, что ВЛКРС может распространяться насекомыми. Следует учесть, что в тропических зонах, где распространены кровососущие насекомые, поражённость лейкозом особенно высока. [27]

ВЛКРС или инфицированные ВЛКРС лимфоциты присутствуют в молоке большинства инфицированных животных. Однако, несмотря на то, что молоко и молозиво инфицированных коров содержат вирус, инфекция новорожденным телятам в естественных условиях передаётся редко по сравнению с контактным заражением [33]

Устойчивость телят к ВЛКРС, вскормленных инфицированными коровами, в течение первых месяцев жизни, вероятно, обусловлена материнскими вирус – нейтрализующими антителами, которые приобретают все телята, получающие молозиво. Если телёнок заражён ВЛКРС во внутриутробный период, то колостральные антитела не влияют на персистенцию вируса. В зависимости от уровня антител в молозиве материнские антитела исчезают в течение 4 – 6 месяцев после рождения [7].

В сперме инфицированных быков ВЛКРС не выявлен. Однако в семени быков при воспалении генитального тракта могут присутствовать лимфоциты, инфицированные ВЛКРС. Экспериментально установлено, что коров можно инфицировать путём нанесения лимфоцитов на слизистую матки. Таким образом, при наличии ВЛКРС в сперме инфицированных быков не исключена передача вируса от быка корове [34].

Механизм развития эпизоотии лейкоза крупного рогатого скота имеет свои закономерности. Предэпизоотическая стадия начинается. как правило, после завоза в благополучные хозяйства инфицированных животных. При определённых условиях: игнорированмя правил асептики и антисептики при нумерации животных, взятии крови, ректальных исследованиях и других, наступает стадия развития эпизоотии, которая может длиться годами, Инфицированность стада может расти от нескольких до 30 – 40 %.

Таким образом, из года в год увеличивается количество источников возбудителя лейкоза, а при наличии путей передачи и восприимчивости животных наступает стадия максимального подъёма, при которой инфицированность стада может достигать 80 – 100 %.

Для классических инфекционных заболеваний ( ящур, грипп, болезнь Ньюкасла и др. ) даже при спонтанном течении, без проведения противоэпизоотических мероприятий характерным является переход стадии максимального подъёма в стадию угасания и прекращения эпизоотического процесса.

Непрерывный инфекционный процесс без иммунной защиты обуславливает отсутствие стадии угасания эпизоотии лейкоза крупного рогатого скота при спонтанном течении.

Таким образом, выходя из эпизоотических особенностей, единым научно - обоснованным путём борьбы с лейкозом крупного рогатого скота является разрыв эпизоотической цепи между источником возбудителя инфекции и восприимчивым организмом. [15]

1.4 Клиническая картина

Клиническая картина лейкоза представляет собой сложный симптомокомплекс, обусловленный морфологическими и функциональными изменениями в органах и тканях кроветворной системы, а также в органах и тканях, в норме не участвующих в кроветворении. При этом важное значение имеют длительность инкубационного периода, форма лейкоза и скорость течения патологического процесса.

Инфекционный процесс лейкоза КРС характеризует стадийность. Различают четыре стадии или периода в развитии инфекции: инкубационную, бессимптомную, гематологическую и опухолевую.

Спустя 2-3 недели после экспериментального и естественного заражения животного вирусом в крови образуются антитела к гликопротеидному ВЛКРС, которые выявляют в сыворотке крови реакцией РИД в геле агара. Этот период считается инкубационным. В последующем от шести месяцев до пяти и более лет у животных не отмечают гематологических и клинико-морфологических изменений, свойственных лейкозу, но постоянно обнаруживают вирус лейкоза и антитела к нему одновременно.

Период инфекционного процесса определяют как бессимптомную стадию. В неблагополучных по лейкозу хозяйствах, где не проводят противолейкозные мероприятия, у 60-80 % взрослых животных выявляют серопозитивную реакцию без клинико-гематологических признаков болезни. Бессимптомная стадия характеризуясь персистенцией одновременно вируса лейкоза КРС в лимфоцитах и антител к нему в сыворотке крови. При этом у животных не обнаруживают заметных отклонений в молочной продуктивности, содержании белка и жира в молоке, массе тела новорожденных.

Стадия гематологического проявления лейкоза (персистентный лимфоцитоз ) – это доброкачественно протекающая лимфоцитарная реакция на вирус лейкоза с образованием антител и типичными клинико –гематологическими признаками. Клинико – морфологическую ( опухолевую ) стадию инфекционный процесс обнаруживали спустя 7 – 14 месяцев или к семи годам после заражения животных ВЛКРС.

В развитии персистентного лимфоцитоза и опухолевой формы лейкоза играют роль генетический фактор и иммунологическая недостаточность.

В зависимости от структуры стада по отдельным возрастным группам количество серопозитивных животных составляет 20 –80 % при нормальных количественных показателях лейкоцитах крови, тогда как в этой же популяции животных с гематологическими изменениями, характерными для лейкоза, у 90 –100 % особей в сыворотке крови одновременно обнаруживают антитела к вирусу лейкоза КРС.

В популяции лимфоидных клеток при лейкозе количество В – лимфоцитов повышалось до 40 – 80 %, тогда как у здоровых животных этот тип клеток составлял только 15 –20 % от их общего количества.

Доказано, что стельность, лактация, доза вируса, возраст животного в момент его заражения оказывают решающую роль на возникновение персистентного лимфоцитоза и образовании лейкозных опухолей.

Опухолевую ( терминальную ) стадию инфекционного процесса отмечают у 5 – 10 % животных ( возраст 4 – 8 лет ) из числа особей с гематологическим проявлением лейкоза и обычно после длительного лейкоцитоза. Иногда опухолевые изменения происходили без предшествовашего им лимфоцитоза.

Количественные изменения состава крови ( лимфоцитоз ), характерные для гематологической стадии лейкоза, в опухолевой стадии болезни могут отсутствовать. Обычно спустя 1 – 5 месяцев после образования опухоли животное погибло. [21]

Патологоморфологические изменения при лейкозе соответствуют клиническим проявлениям болезни. У животных обнаруживают опухолевые разрастания, нарушавшие дифференцировку кроветворных клеток в костном мозге, селезёнке, лимфотических узлах, тимусе, в матке и других внутренних органах не связанных с кроветворением [9].

Нередко увеличенные лимфоузлы и лейкозные разросты,. локализуются в грудной и недоступной исследованию брюшной полостях. В этих случаях о их наличии можно судить по нарушению функции соответствующих внутренних органов, в которых или по соседству с которыми они локализуются. При лейкозе снижается молочная продуктивность и качество молока. У больных лейкозом животных удои молока уменьшаются на 5,4 – 10,2 %,а у инфицированных – на 2,0 – 7, 0 %. В молоке и сыворотке крови таких животных достоверно снижаются общий белок и большинство аминокислот ( фенилаланин, валин, лейцин, гистидин, метионин ). Полученные данные ( из работы Кузина А. И.,Закрепина Е. Н. ) говорят о нецелесообразности длительного содержания в стаде серопозитивных коров при оздоровлении хозяйства от лейкоза.

1.5 Диагностика

Основой успеха профилактических и оздоровительных мероприятий являются ранняя и точная диагностика лейкоза. Особенно большое значение она имеет при первичном установлении неблагополучия стада по заболеванию [6].

До 1987 г. для диагностики лейкоза в основном применяли гематологический и патологоанатомический методы диагностики. В основе патологоанатомических изменений при лейкозе лежит избыточное разрастание патологической кроветворной ткани как в органах системы кроветворения, так и за её пределами. [8]

Так лимфоузлы при лейкозе имеют следующий вид: увеличены, капсула напряжена, мягкой эластичной консистенции, поверхность разреза влажная, салоподобная, серовато – или желтоватобелого цвета, мраморность, кровоизлияния.

Селезёнка увеличена в 8 – 10 раз, возможен разрыв капсулы с полостным кровотечением, пульпа рыхлая, малинового цвета, на разрезе выпячивается из капсулы с большой силой, поверхность разреза гладкая или зернистая.

Разрастание зернистой ткани и инфильтрация паренхимы почек лимфоидными клетками могут быть выражены в разной степени, в некоторых случаях лейкозная ткань разрастается вокруг почек и мочеточников. Вследствие сдавливания мочевого пузыря невозможен отток мочи.

Печень увеличена, более светлая чем обычно, на поверхности видны лейкозные разросты различной величены.

Гематологический метод исследования на лейкоз включает в себя главным образом количественный и качественный анализ белых клеток крови.

Увеличение в крови общего количества лейкоцитов является важным признаком лейкоза. Однако этот показатель имеет относительное значение и особенно при сублейкемической и лейкемических формах болезни. Поэтому неотъемлемой частью гематологического исследования является определение количества (или процента ) собственно лимфоцитов или всех одноядерных лимфоидных клеток.

Для диагностической оценки результатов количественного анализа форменных элементов крови (лейкоцитов, лимфоцитов ) предложены различные критерии, названными лейкозными ключами. Для нашей территории критерием оценки гематологических исследований является определение количества лейкоцитов, процента и абсолютного количества лимфоцитов [7].

Используемые ранее гематологический, клинический и патологоанатомический методы исследований позволяли ставить диагноз лишь через несколнаько лет после заражения животных, которые всё это время были источником возбудителя инфекции. Данные литературы (Мандыгра Н. С; Цымбал В. И. и др.) свидетельствуют, что отсутствие методов ранней диагностики послужило основной причиной широкого распространения лейкоза крупного рогатого скота в 1960–1980 гг. при завозе племенных животных из инфицированных стад.

В настоящее время для диагностики лейкоза разработаны новые высокоспецифические серологические методы, основными из которых есть реакция диффузной преципитации, метод иммуноферментного анализа, радиоиммунный анализ, реакция связывания комплемента, иммунофлюресцентный, цитотоксичный, иммунохимичный и другие методы исследований.

Реакция диффузной преципитации в агаровом геле получила наибольшее признание, благодаря простоте постановки и высокой чувствительности. С её помощью можно выявить наличие специфических преципитирующих антител через 15-30 дней после заражения.[15]

Однако вместе с этим в литературе есть много данных о нестабильности реакции РИД при лейкозе, частое её выпадение. Многие авторы ( Павлов Т., 1988; Лахт Т. И., Марран Х. Е., 1988 ; Лахт Т. И., Марран Х. Е., Каяв А. Г., 1989 ) объясняют это физиологическим состоянием животного и указывают на очевидные особенности течения инфекционного процесса у глубоко стельных коров, а именно отсутствие антител к вирусу лейкоза в момент отёла. По данным исследования Лахта Т. И. и соавторов ( 1988 ) уровень антител к ВЛКРС начинал снижаться за 15 дней до отёла и большинстве случаев достигал предыдущих показателей на 15 день после отёла. При этом следует отметить, что титр антител у всех исследованных животрых снижался в 2 – 3 раза, а за 3 – 5 дней до отёла в 35 – 43,7 % случаях животных с низкой иммунологической реактивностью реакция выпадала.

По мнению Ярчука Б. М. и Домбровского О. Б. ( 1995 г.) титр антител к ВЛКРС в сыворотке крови снижается с увеличением сроков беременности. Они отмечали, что у коров на шестом месяце беременности антитела выявляются в титре 1:32 – 1: 64, на седьмом месяце стельности этот показатель был в пределах 1:8 – 1:16, на восьмом месяце стельности соответственно 1:4 – 1:8, а на девятом месяце стельности антитела у коров определяются лишь в разведении сыворотки 1:2 и нативной сыворотке. Дальнейшие исследования сывороток крови свидетельствует о снижении уровня антител за 30 и 15 дней до отёла в 2 – 16 раз, а в момент отёла – уменьшается до минимума, при этом у 56 % коров антитела к вирусу лейкоза выявляли лишь в нативной сыворотке, а у 44 % - наблюдалось выпадение реакции. Такие колебания, по их мнению, связаны с физиологически обусловленным переходом иммуноглобулинов из крови в молозиво. Исследования сыворотки крови через 15 дней после отёла свидетельствуют про то, что уровень антител к вирусу лейкоза постепенно восстанавливается, так как установлено наличие антител к ВЛКРС у 92 % животных в разведении 1:2 – 1:16 и лишь у 8 % антитела, в этот период, отсутствуют.

Серологические исследования секрета молочной железы до отёла и молозива после отёла показали, что с приближением сроков родов происходит увеличение уровня антител к вирусу лейкоза в молозиве по сравнению с секретом в 2 – 4 раза в 88 % случаев и в 8 раз в 12 % случаев. Авторы рекомендуют учитывать колебания серологических реакций (РИД) в момент отёла при проведении диагностики заболевания и оздоровительных противолейкозных мероприятий.

Аналогичные результаты получены Мандыгрой Н. С. (1995). Согласно его исследованиям у всех коров резко снижается титр антител после отёла, а у 52 % реакция выпадает и восстанавливается только через 37 – 43 дня.

Таким образом, у глубокостельных коров наблюдается временное выпадение реакции иммунодиффузии в момент отёла, так называемая отрицательная серологическая фаза.

Однако, несмотря на вышеперечисленные недостатки иммунодиффузный тест диагностики лейкоза КРС является высоко чувствительным, экономичным и доступным для практики. Другие методы диагностики этого заболевания на современном уровне их разработки могут быть использованы при дополнительных исследованиях.

Применение метода гибридом антител (МКЛ) в и моноклональных биологических и медицинских исследованиях (Малоголовский С. А.,1997) изменило представления о структуре разных антигенов (в том числе вирусных) и антител, функции отдельных компонента вириона в развитии иммунных реакций, роли разных типов антител в нейтрализации вирусов.

Ученые, занимающиеся проблемами лейкоза КРС, оценили возможности, возникающие при использовании МКА, и взяли на вооружение биохимическигомогенные, направленные только против одной антигенной детерминанты, весьма стабильные по специфичности иммунные реагенты.

В большинстве случаев постоянным характерным признаком инфицированности животных ( особенно на ранней стадии болезни ) является наличие АТ к главному оболочечному гликопротеиду Ср 51, поэтому первые моноклональные антитела были получены именно к этому полипептиду. На основании полученных данных предложено использовать МКА для серологической диагностики лейкоза КРС.

Высокая чувствительность ИФА на основе МКА в отличии от РИД позволяет быстро и массово исследовать сыворотки, собранные у животных отдельного стада. С помощью данного метода можно выявлять стада, в которых уровень инфицированных не превышает 1%. Однако иммуноферментный анализ и реакция иммунодиффузии не способны дифференцировать материнские антитела у молодых животных от активных АТ, продуцирующих при вирусной инфекции. В этом случае высокая чувствительность ИФА с применением МКА может затруднять оценку нормы продолжительности колострального иммунитета, так как тест – ИФА позволяет выявлять материнские антитела в более поздние сроки, чем РИД.

Данные литературы свидетельствуют о том, что моноклональные антитела можно с успехом использовать для диагностики лейкоза крупного рогатого скота. Однако на сегодняшний день реакция иммунодиффузии остаётся простейшим достаточно чувствительным диагностическим тестом, позволяющим быстро определить инфицированность стада. Для постановки же ИФА требуется дополнительное оборудование и навыки. Трудоёмкость процесса можно снизить, если заблаговременно иммобилизировать антитела на пластинке или заранее сенсибилизировать полистероловые планшеты не только моноклональными антителами, а и антигеном, который связан с этими МКА. [1]

Вследствие того, что часть инфицированных животных из – за низких титров антител к вирусу лейкоза крупного рогатого скота может остаться не обнаруженной при иммунологических методах исследования, крайне необходимы разработка и использование высокочувствительных методов выявления инфицированных животных, бессимптомного вирусоносительства как основного источника горизонтальной (контактной ) передачи и распространения возбудителя лейкоза.

Развитие биотехнологии привело к созданию диагностического метода определения инфекционных болезней, основанного на уникальности геномов возбудителей этих инфекций – полимеразной цепной реакции ( ПЦР ). В настоящее время ПЦР – наиболее чувствительный и спецефичный метод диагностики, с помощью которого можно определить единичные копии вируса в клеточном образце.

Полимеразная цепная реакция состоит из серии циклов, в каждом из них происходит удвоение числа тестируемых молекул ДНК. Сначала тестируемую молекулу ДНК при нагревании до 94 –95 С разделяют на две комплементарные цепи. При охлаждении до 50 – 60 С с цепями ДНК соединяются искусственные синтезированные специфические ДНК – олигонуклеотиды ( прайнеры ). При нагревании до 70 С термостабильная ДНК – полимераза достраивает цепи ДНК. Всё это происходит в каждом цикле, которые повторяются 20 – 30 раз. Инфекционная ДНК умножается до количества достаточного для определения её, например, методом электрофореза.

Метод полимеразной цепной реакции – надёжный и достоверный тест для раннего выявления инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота животных, его с успехом можно использовать для определения источника инфекции в стадах, при племпродаже, профилактике и на заключительных этапах искоренения ретровирусной инфекции. У животных с незначительно повышенными морфологическими показателями крови ПЦР позволяет достоверно отличать лейкемоидное состояние организма от ранней стадии лейкозного процесса.

Данный метод вследствие его высокой чувствительности. Чёткой воспроизводимости результатов и длительной сохранности клеточных препаратов, даёт возможность дальнейшего изучения этиологии и патогенеза лейкоза крупного рогатого скота [11].

1.6. Профилактика, меры оздоровления неблагополучных хозяйств

В борьбе с лейкозом крупного рогатого скота большое значение имеет комплекс профилактических мероприятий по обеспечению стойкого благополучия стад, свободных от заболевания. В его основу должно быть положено:

- точное знание эпизоотической ситуации по лейкозу в районе на основании данных различных исследований;

1.  разделение стада на три группы: свободные от инфекции, стадо со скрытым течением инфекции и неблагополучные по лейкозу;

2.  завоз животных в стадо первой группы только из свободных от инфекции хозяйств, в стадо второй и третьей групп – из хозяйств первой группы животных, свободных от вируса лейкоза аналогичных стад;

3.  пастеризация молока и обрата; проведения общих ветеринарных и санитарных мероприятий.

В условиях хозяйств наиболее рационально, экономически оправдано и тактически направлено на результат оздоровления является разработанная система оздоровительных мероприятий в зависимости от степени инфицирования скота. При всех системах основным методом диагностики является РИД. Учитывая это, разработаны системы оздоровительных мероприятий для хозяйств с инфицированностью крупного рогатого скота: до 6 % ( система 1 ); от 6 до 30 % ( система 2 ); более 30 % (система 3 ).

При оздоровлении по системе 1 предусматривалось выделение из неблагополучного по лейкозу стада серопозитивного скота для убоя или для откорма. Оставшихся РИД – негативных животных предусматривается эксплуатировать согласно технологии и подвергать систематическим серологическим исследованиям через каждые 30-45 дней до полного оздоровления, то есть до получения двух подряд негативных результатов исследования стада. При такой незначительной инфицированности стада использование указанной системы обеспечивает оздоровление за полтора года.

При оздоровлении по системе 2 предусматривается разделение стада на серопозитивных и серонегативных. Серопозитивных коров, нетелей рекомендуется выделять на отдельную ферму хозяйства либо в отдельное помещение однофермных хозяйств, а серопозитивный молодняк после откорма сдавать на убой. Этой системой предусмотрена эксплуатация серопозитивного стада коров и нетелей, согласно с предложенной технологией в хозяйстве, не более двух лет. При этом молодняк, полученный от этих животных, с 7 – дневного возраста выпаивают молоком коров РИД – негативного стада, а с 4–6–месячного возраста подвергают систематическому (через каждые 30 – 45 дней) серологическому контролю. Серопозитивное стадо коров и нетелей исследуют клинико–гематологически, больных животных отправляют на убой. Пополнение стада проводят серонегативными нетелями. Молоко, полученное от серопозитивных коров, пастеризуют и сдают на молокоперерабатывающее предприятие.

Основное серонегативное стадо крупного рогатого скота используют по предложенной в хозяйстве технологии ведения животноводства.

Проведение противоэпизоотических мероприятий по донной системе позволяет достичь оздоровления стад от лейкоза в течение 2 – 3 – х лет, не допуская снижения поголовья и продуктивности животных [16].

При оздоровлении хозяйств по системе 3 серопозитивных животных используют не дольше 4-х лет.

Животные, у которых установлена позитивная на лейкоз серологическая реакция (РИД), повторному серологическому исследованию не подлежат.

Хозяйство считают оздоровленным после изолирования всех серопозитивных животных и получения 2-х подряд негативных результатов серологического исследования (с интервалом 30-45 дней) животных старше 4-6-ти месячного возраста. В первый год после оздоровления серологические исследования проводят через 6 месяцев.

В 1994-95 гг. впервые на Украине было проведено изучение иммуногенных возможностей вакцины против лейкоза крупного рогатого скота, созданной доктором медицинских наук Нагаевой Л. Результаты испытания препарата показали, что вакцина обеспечивает защиту в среднем 83 % животных от возможного заражения животных вирусом лейкоза. На основании этого вакцина против лейкоза крупного рогатого скота была рекомендована хозяйствам Украины для использования в широком производственном деле согласно указа главного госветинспектора Украины от 25. 01 1996 года.

Вакцина имеет следующие преимущества:

4.  значительно снижается количество восприимчивых животных к лейкозной инфекции в следствии специфичной защиты организма;

5.  позволяет сократить период оздоровления неблагополучного хозяйства в два и более раза;

6.  повышает общий экономический эффект от осуществления оздоровительных и профилактических противолейкозных способов;

7.  может быть эффективным средством профилактики животных в благополучных группах, которые имеют контакты с неблагополучными по лейкозу стадами или условно здоровым поголовьем;

8. Вакцинированные коровы являются постоянным источником противолейкозных антител, которые передаются потомству через молозиво и защищает молодняк от возбудителя лейкозной инфекции в первые месяцы после рождения;

9. Напряжённость постванцинального иммунитета сохраняется на защитном уровне в продолжении двух – двух с половиной годов, что позволяет увеличить период от вакцинации до ревакцинации с шести месяцев до двух лет (Л. И. Нагаева и др., 1995)

2. Собственные исследования.

2.1. Цель и задачи

Целью нашей дипломной работы было изучить эпизоотическую ситуацию по лейкозу крупного рогатого скота в СООО «Нива» Тельмановского района Донецкой области и провести анализ эффективности противолейкозных мероприятий. Для достижения намеченной цели были поставлены следующие задачи:

1. Провести эпизоотологическое обследование хозяйства;

2. Определить динамику инфицированности крупного рогатого скота лейкозом за 2001-2007 гг.;

3. Определить особенности течения эпизоотического процесса лейкоза крупного рогатого скота у различных возрастных групп животных;

4. Провести анализ плана мероприятий по оздоровлению СОО «Нива» от лейкоза крупного рогатого скота;

2.2. Материалы и методы

Материалом исследования были акты эпизоотологического обследования хозяйства, данные годовых отчетов: «Отчет о заразных болезнях ф-№ 1-вет» и «Отчет о противоэпизоотических мероприятиях ф-№1-А-вет» за изучаемый период; Результаты экспертиз исследования сыворотки крови от животных содержащихся в хозяйстве.

Некоторые вопросы эпизоотического распространения лейкоза крупного рогатого скота в Тельмановском районе изучали путём сбора и анализа статистического материала за предыдущие годы. Анализу были подвергнуты статистические материалы по диагностике и способам борьбы с лейкозом КРС в Тельмановском районе, которые находились в Тельмановской государственной лаборатории ветеринарной медицины (ТГЛВМ), а также годовые отчёты и документация в коллективных сельскохозяйственных предприятиях.

В анализе учитывали ежегодное число выявленных при серологическом и гематологическом исследовании положительно реагирующих животных проводимых в ГЛВМ Тельмановского района Донецкой области.

Серологические исследования крупного рогатого скота на лейкоз проводили при помощи РИД (реакции иммунодиффузии).

Постановка реакции иммунодиффузии.

Сущность метода заключается в выявлении в сыворотке крови животных с помощью РИД преципитирующих антител против антигенов онкорнавируса типа С крупного рогатого скота. Антиген хранят при минус 20 С или лиофилизируют. Перед постановкой РИД приготовленный антиген сравнивали со стандартным антигеном, проверенным на специфичность и активность; сыворотку положительную с преципитирующими антителами с титром антител к гп-антигену от 1:16 до 1:32 в РИД получают от естественно или экспериментально заражённого крупного рогатого скота.

Расплавленный 0,8 % - ный раствор агара наносили равномерным слоем толщиной 2 – 3 мм. на предметные стёкла. После застывания агара специальным штампом делали лунки, не допуская образования трещин между ними и отслоения агара от стекла.

Антиген вносили в центральную лунку, две диаметрально противоположные лунки заполняли контрольной сывороткой. Оставшиеся периферические лунки заполняли испытуемыми сыворотками. Для внесения компонентов в лунки использовали стерильные пипетки. После заполнения всех лунок стёкла оставили в больших стерилизаторах и хранили во влажной камере при температуре от 18 до 24 С. Реакцию учитывали через 48 – 72 ч. Стёкла просматривали на тёмном фоне, направляя сфокусированный луч осветителя на дно чашки под углом 30 – 45. Реакцию оценивали по контрольной линии преципитата. Если она отсутствовала или была слабо выражена, то реакцию считали неудавшейся и её повторяли.

Положительно реагирующей считали сыворотку:

10.  если между лунками с антигеном и испытуемой сывороткой образовывалась полоса преципитации, которая соединялась с контрольной линией;

11.  если линия преципитации между лунками с сывороткой и антигеном отсутствовала, но контрольная линия образовывала в близи лунки с испытуемой сывороткой изгиб, направленный в сторону лунки с антигеном;

12.  если образовывалась вторая линия преципитации, которая располагалась ближе к лунке с испытуемой сывороткой и указывала на наличие в сыворотке преципитирующих против второго антигена антител ( р24 ) онкорнавируса типа С крупного рогатого скота;

13.  если контрольная линия была значительно укорочена со стороны лунки с испытуемой сывороткой и имела размытый изгиб в сторону лунки с антигеном или располагалась очень близко к лунке с антигеном;

14.  если образовывалась неспецифическая линия преципитации.

Отрицательно реагирующей считали сыворотку:

15.  если контрольная линия преципитации продолжалась до лунки с испытуемой сывороткой без загибов или с небольшим загибом в сторону лунки с контрольной сывороткой;

16.  если формировалась неспецифическая линия преципитации; при этом она перекрещивалась с контрольной линией.

Сомнительно реагирующей считали сыворотку, если контрольная линия преципитации плохо просматривалась вследствие наличия неспецифической линии преципитации. В этом случае проводили повторное взятие молока и молозива у этого животного и исследовали сыворотку.

Если сомнительная реакция была зафиксирована дважды, с интервалом один месяц между исследованиями, сыворотку считали положительно реагирующей.

Для изучения некоторых эпизоотических особенностей лейкоза крупного рогатого скота были использованы описательный, сравнительный и статистический методы исследования.

2.3. Показатели развития животноводства и состояние ветеринарной работы хозяйства

Акт эпизоотологического обследования хозяйства.

Октябрь 2007 г.

Донецкая область, Тельмановский район, СООО «Нива».

СООО «Нива» Тельмановского района расположено в западной части Донецкой области. Хозяйство граничит с агроцехами №7,№33,№39,№37 агрокомплекса ОАО ММК им. Ильича, агрофирма Мичурино Тельмановского района. Через земли СООО «Нива» проходит трасса Новоозовск-Донецк. Центральная усадьба находится в районном центре п. Тельманово. Расстояние до горда Донецка 87 км, до города Волноваха 50 км, до бдижайшей железнодорожной станции села Андреевка 27 км.

Общая земельная площадь хозяйства 5725 га. Из них сельхозугодий 5410 га., в т. ч. пашни 4065 га., пастбища 1313га., ставки и водоёмы 12га., орошаемых земель 2061 га.

В СООО «Нива» развиты следующие отрасли животноводства: скотоводство, свиноводство. Общая численность скота: КРС 625 голов, в т. ч.телят текущего года 145, быков на откорме 90 и коров 280,бык-производитель 1,нетелей 13,откорм 96.

Породный состав стада представлен– красной степной и чёрнопёстрой - голштинофризской породами.

Содержания взрослого скота в зимнее и летнее время стойлово – выгульное в типовых коровниках и базах. Нетели содержатся в приспособленном помещении, в котором тоже имеются базы ( беспривязное содержание ). Всего на территории фермы три коровника. На ферме имеется родильное отделение и профилакторий. Новорожденный молодняк содержится в индивидуальных клетках в родильном отделении до 10 – дневного возраста. Живая масса при рождении до 30 кг, среднесуточный прирост 510 грамм. Затем их переводят в типовые телятники где содержат группами по 6-10 животных в каждой клетке

Кормовая база животноводства базируется на кормах собственного производства. В хозяйстве отсутствуют искусственные и естественные пастбища. Для кормления животных в зимний период используют следующий рацион:

17.  силос кукурузный – 10 кг.

18. Сенаж вико – овсянный – 15 кг.

19. Сено люцерновое – 2 кг.

20. Солома ячменная – 3 кг.

В летнее время животные получают зелёную массу. Кормление осуществляется ручным способом, поение из автопоилок уборка навоза механическая,

В 2007 году было заготовлено кормов: силос – 1345 ц., сенаж - 648 ц., солома – 518 ц., сена – 492 ц.

За 2007 г. в хозяйстве на одну фуражную корову надоено молока 3254 кг. На сто коров получено 84 телят.

Территория фермы огорожена двухметровым железобетонным забором, санпропускник и дезбарьер отсутствует. Подъездная дорога к животноводческим помещениям не имеет твёрдого асфальтированного покрытия. На территории фермы отсутствуют зелёные насаждения.

Имеется специальное помещение для ветеринарной аптеки, кабинет врача ветеринарной медицины, пункт искусственного осеменения, убойный пункт. Изолятора и помещения для карантинирования животных нет. Вскрывочный стол в помещении бойни. Для обеззараживания трупов, выбракованных при ветсанэкспертизе органов используют скотомогильник.

В настоящее время в хозяйстве работают: один главный врач ветеринарной медицины, один ветврач, фельдшер, техник искусственного осеменения, зоотехник. Из-за материальных трудностей ветеринарное обслуживание производится не на должном уровне ( обеспеченность медикаментами, биопрепаратами очень низкая). Спецодеждой специалисты не обеспечиваются, так же как и необходимыми инструментами.

Комплектование стада осуществляется за счёт собственного поголовья. При ввозе животных из других хозяйств профилактическое карантинирование не соблюдается.

Ежегодно проводится вакцинация крупного рогатого скота против паратифа телят, трихофитоза телят, сибирской язвы и лептоспироза. Проводят диагностические исследования на лейкоз, бруцеллёз, лептоспироз и туберкулинизацию в соответствии с планом противоэпизоотических мероприятий. Вакцинации и диагностическим исследованиям подвергают скот, принадлежащий населению.

Из инфекционных заболеваний ранее в хозяйстве регистрировали трихофитоз телят. В настоящее время хозяйство неблагополучно по лейкозу крупного рогатого скота.

Лейкоз крупного рогатого скота регистрируется в хозяйстве с 1980 года. Первый случай лейкоза был диагностирован гистологическим методом 19.12.80 г. С 1988 г. все поголовье крупного рогатого скота начиная с 4-6 месячного возраста исследуется серологически на лейкоз в реакции РИД.

Таблица 2.1. Динамика выделения животных больных лейкозом в

СООО «Нива» за 2001-2006 г.

Из таблицы 2 видно что количество исследуемых в РИД животнйх ежегодно сокращаеться с 834 голов в 2001 году до 670 голов в 2006 году. Это связано с сокращением поголовья в хозяйстве.

В 2001 году из 834 голов происследованых животных положительную реакцию в РИД дали 186 голов, процент инфецированности составляет 22,3%. В 2002 году было происследованно 820 голов крупного рогатого скота из них 157 прореагировало положительно, что составило 19,1% от общего количества происследованных животных. В 2003 году из 811 голов подвергнутых исследованию на лейкоз,133 дали положительный результат, уровень инфецированности в хозяйстве составил 16,3%. В 2004 году исследованию были подвергнуты 756 животных, из которых было РИД положительно выявлено у 113 голов ,что составило 14,9%. В 2005 году количество крупного рогатого скота происследованных РИД составляет 724 головы из них положительную реакцию дало 101 животное (13,9%). В 2006 году было происследованно 670 голов из них 82 головы прореагировали положительно. Процент инфецированности в хозяйстве при этом составляет 11,8%.

Проанализировав данную таблицу мы видим, что с 2001 по 2006 год в СООО «Нива» количество больных животных (РИД положительных) снизилось с 186 голов до 82. Степень инфецированности крупного рогатого скота лейкозом за данный период уменьшелось с 22,3% до 11,8%.

Животных прореагировавших РИД положительно изолируют, и они находятся в отдельном помещении от здоровых животных. После взятия крови, для диагностических исследований, проводиться дезинфекция коровника. При проведении ветеринарных обработок правила асептики и антисептики соблюдаются на должном уровне. Мероприятия по оздоровлению хозяйства проводятся в соответствии с инструкцией по профилактике и оздоровлению крупного рогатого скота от лейкоза от 3.07.1992 года. За последние 5 лет (2001-2006 год) инфицированность стада снизилась с 22,3% до 11,8%. В течении 2007 года все РИД положительные животные были выбракованы и сданы на убой. Были получены двух кратные отрицательные результаты в РИД по всему стаду. В 2007 году рукаводством хозяйства по совместительству с главным государственным инспектором ветеринарной медицины Тельмановского района было принято решение оздоровить хозяйство путем убоя всех РИД положительных животных с января по октябрь 2007 г. По состоянию на 1.10.2007 хозяйство считается свободным от больных лейкозом животных и находится на 6 месячном контроле.

Таблица 2.2. Эпизоотические процессы лейкоза КРС различных возрастных групп СООО «Нива» Тельмановского района.

Проанализировав данные таблицы 2.2., мы видим, что с 2001 года по 2006 в СООО»Нива» количесво больных животных снизилось с 186 до 82 голов. Степень инфицированности крупного рогатого скота лейкозом за данный период уменьшилась с 22,3 % до 11,8 %.

Лейкоз КРС в СООО «Нива» имел неравномерное распространение среди животных различных возрастных групп.

Так в 2001 году процент инфицированности коров от общего количества РИД положительных животных составил 65,6 % или 122 животных, молодняк старше года 22,1 % или 41 голова, молодняк до года 12,3 % или 23 головы. С 2002 года по 2004 год процент РИД положительных животных у различных возрастных групп колебался в указанных пределах : у коров от 61,9 % до 62,4 %, молодняк старше года от 25,5 до 26,4 % , молодняк до года от 12,0 до 12,4 %.

Начиная с 2005 года количество РИД положительных коров уменьшилось до 59 голов, что составило 58,4 %, молодняк старше года реагировало позитивно в 24 случаях - 23,7 %, количество молодняка до года положительно реагирующих в РИД по сравнению с предыдущим годом несколько возрасло до 17,8 %, что составило 18 голов.

В 2006 году численность РИД положительных коров снизилась до 36,6 % (30 голов), молодняк старше года увеличилось до 45,1 % и составило 37 голов, молодняка до года повысилось до 18,3 % или 15 голов.

До 2007 года хозяйство оздоравливалось путем систематических серологический исследований в РИД каждые 30 дней. По результатам исследований, РИД положительных животных изолировали в отдельный коровник и в течение 15 дней исследовали гематологически. При отрицательном исследовании животных придерживали в хозяйстве до 2 лет.

В 2007 году руководством хозяйства по совместительству с главным гос. инспектором ветеринарной медицины Тельмановского района было принято решение оздоровить хозяйство путём убоя всех РИД положительных животных с января по октябрь 2007 года.

2.4. Результаты собственных исследований и их обсуждение.

Первый случай лейкоза КРС в Тельмановском районе был зарегистрирован в 1974 году гистологическим методом в колхозе им. Мичурино. Серологические исследования на лейкоз КРС начали проводить с 1988 года в ГЛВМ Тельмоновском районе Донецкой области после утверждения «Инструкции по мерам борьбы с лейкозом КРС» в 1985 году. В результате проведённых исследований установлено поражение КРС вирусом лейкоза во всех, без исключения, хозяйствах района, процент пораженности животных по району находился в пределах от 6% до 49,5%.

С 1991 года на основании инструкции по ликвидации лейкоза исполком районного совета народных депутатов принял решение о наложении ограничений по лейкозу КРС на МТФ хозяйств района. В настоящее время организация способов борьбы с лейкозом в Тельмановском районе проводится согласно разработанному на Украине плану основных мероприятий по оздоровлению КРС от лейкоза на 1990 – 2006 годы. В результате проведённых мероприятий за период с 1990 года по 2006 год оздоровлено от лейкоза 4 хозяйсва, осталось 5 хозяйств.

Степень инфицированности в неблагополучных хозяйсвах составляет от 1 до 15%.

Оздоровление хозяйств района затруднено из-за не соблюдения основных мероприятий действующей инструкции:

передержкой в стаде инфицированных вирусом животных;

21.  нарушением режима изолированного выращивания ремонтного молодняка;

22.  отсутствием родильных отделений для животных больных лейкозом. В следствии чего отёл больных проводится вместе со здоровыми коровами

23.  ;выпаиванием новорожденных телят непастеризованным молоком;

24.  несоблюдением правил асептики и антисептики при зоотехническом и ветеринарном обслуживании животных.

В период прохождения производственной практики, я непосредственно принимал участие в мероприятиях по оздоровлению в СООО «Нива» Тельмановского района от лейкоза.

За время прохождения практики дважды отбирали кровь у животных для исследования на лейкоз. По результатам исследований было выявлено три РИД положительных животных.

Больные животные в этот же день были изолированы, а впоследующие 15 дней от них была отобрана кровь для проведения гематологических исследований, все трое животных дали отрицательный результат. В течении 5 дней данные животные были подвергнуты выбраковки и убою на санитарной бойне хозяйства (акт прилогается).

План специальных и организационно – хозяйственных мероприятий по оздоровлению крупного рогатого скота от лейкоза в СООО «Нива» Тельмановского района Донецкой области на 2007 год.

При анализе плана специальных и организационно – хозяйственных мероприятий по оздоровлению крупного рогатого скота от лейкоза в СООО «Нива» Тельмановского района можно сделать вывод, что не все его пункты выполняются в полном объёме. При получении положительных результатов РИД, животные изолируются в отдельное помещение. Это не приводит к перезаражению здоровых животных. Диагностические исследования проводятся не всегда регулярно. Не всегда диагностики подвергается молодняк. Не своевременно осуществлялась дезинфекция помещений, а в настоящее время, в связи с недостаточностью материальных средств, она проводится только в телятнике. Дойку у РИД – позитивных и РИД – негативных коров проводят одним доильным аппаратом. Молоко сдают на молокозавод без предварительной пастеризации в хозяйстве. Телят выпаивают не обеззараженным молоком, а молодняк полученный от РИД – положительных и РИД – отрицательных животных содержится в одном помещении.

2.5. Ветеринарная экология

Получение экологически чистого молока в СООО «Нива» Тельмановского района Донецкой области при условии оздоровления хозяйства от лейкоза.

Качество молока и изготовленных из него продуктов во многом определяется санитарными условиями и его получения, первичной обработки и хранения на ферме, своевременной доставки перерабатывающие предприятия, четким соблюдением установленных технологий переработки в молочные продукты.

Получение молока высокого санитарно – гигиенического качества зависит также от выполнения комплекса требований к устройству и оборудованию помещений и территорий молочных ферм и комплексов, обеспечение надлежащего санитарного состояния животноводческих и доильных помещений, ветеринарно - санитарных требований по уходу за животными при доении коров, первичной обработке, хранении, транспортировке и переработке молока, соблюдая правила личной гигиены работников ферм и др.

Бактериальная чистота или степень обсеменения молока микроорганизмами является важнейшим показателем, характеризующим его санитарно – гигиеническое качество. Такие изменения молока, как сквашивание, появление несвойственного запаха, вкуса и другие, возникают в результате развития в нем микроорганизмов, для которых молоко является очень хорошей питательной средой.

Интенсификация растениеводства на основе внесения в севообороты повышенных доз азотистых минеральных удобрений. Широкое внедрение в ветеринарную практику антибиотиков, многообразие применяемых моющих и дезинфицирующих средств способствуют более рациональному использованию земли.

Вместе с тем одновременно увеличивается вероятность попадание названных веществ в корма, а затем и в молоко, что делает необходимым усиление контроля за санитарно – гигиеническими показателями этого важнейшего продукта питания людей с тем, чтобы обеспечить полную безопасность его потребления.(В. И. Хоменко, 1990)

При применении различных антибиотиков из организма коров с молоком зависит от природы антибиотика, вида растворителя, места введения. Кендал (1975) считает, что молоко от коров, подвергшимся лечению гентамицином в дозе 100 мл внутривенно, можно использовать лишь через 120 часов.

Молоко, полученное от коров, подвергавшихся лечению антибиотиками, запрещается использовать для пищевых целей после последнего введения препарата:

- при внутримышечном введении непролонгированных форм пенициллина, тетрациклина, окситетрациклина, неомицина – в течение 12 часов, стрептомицина – 2 суток, экмоновоциллина – 1, бициллина – 15 суток;

- при внутривыменном введении пенициллина – в течение 2 суток, окситетрациклина – 5, эритромицина – 1, мономицина – 1, стрептомицина – 5 суток.

Молоко, в котором обнаружены антибиотики, используют после кипячения в корм животным.

Совместно с Т. Т. Гриценко, В. А. Матузенко, Н. Г. Кононович, Г. Т. Титаренко на молокоперерабатывающих предприятиях и молочных фермах разных зон Украины были проведены исследования по уточнению методики определения антибиотиков и других ингибиторов в заготовляемом молоке. Метод основан на определении биохимической активности индикаторной бактериальной культуры в исследуемом молоке с использованием резазурина и штамма термофильного стрептококка, чувствительного к антибиотикам.

Азотные удобрения относятся к категории химических соединений повышенной опасности вследствие большого объёма их применения, постоянного поступления их в организм животных с кормами, питьевой водой и образованием в кормах и организме продуктивныхживотных высокотоксичных нитритов и весьма опасных нитрозамидов.

Молоко от коров, перенесших отравление нитратами, можно использовать в пищу при получении его через 72 ч после клинического выздоровления животных.

Мастит является одной из важнейших проблем молочного скотоводства. У заболевших животных нарушаются процессы молокообразования и молокоотдачи, происходят глубокие изменения физико – химического состава молока, резко снижаются его санитарные и биологические качества.

Для предотвращения загрязнения молока выдвинуты следующие требования:

25.  работники ферм, имеющие отношение к молоку, должны иметь личные санитарные книжки и регулярно проходить медицинские осмотры;

26.  руки операторов машинного доения и рабочих должны быть чистыми. Лица, работающие с молоком, должны следить за чистотой лица, всего тела обуви, а также иметь спецодежду и полотенце;

27.  перед доением мастера машинного доения обязаны тщательно вымыть теплой водой с мылом, вытереть их чистым индивидуальным полотенцем;

28.  непосредственно перед доением внимательно осмотреть и обмыть вымя и соски тёплой водой или раствором рекомендованных препаратов, при этом воду в ведре необходимо заменить после каждого животного, предварительно ополоснув посуду;

29.  первые струйки молока сдаивать в отдельную посуду. Использование такого молока в пищу не разрешается;

30.  после каждой дойки нужно доильные аппараты промывать.

В СООО «Нива» многие требования по оздоровлению хозяйства от лейкоза КРС, предотвращение загрязнения молока не выполняются.

Разделение стада на РИД – позитивных и РИД – негативных не проведено. Поэтому больные и здоровые животные находятся в одном помещении. Молоко получаемое от этих животных собирают в одну посуду. Доильные аппараты используют как для здоровых, так и для больных коров. Пастеризацию молока в хозяйстве не проводят и такое молоко спаивают телятам.

Доярки обмывают вымя у коров из одного ведра, не меняя воду. Спецодежда у скотников отсутствует, а у доярок если есть, то грязная. Первые струйки молока не сдаиваются в отдельную посуду, что ведёт повышению числа микроорганизмов в молоке. После лечения коров антибиотиками, молоко не подвергается кипячению, а скармливается телятам или сдаётся на молокозавод.

Вышеперечисленные недостатки не только не дают возможность получать экологически чистое молоко, но и не дают провести полное оздоровление хозяйства от лейкоза.

Для получения экологически чистого молока необходимо проводить следующие мероприятия:

31.  разделить стадо на РИД-позитивных и РИД-негативных;

32.  для доения серопозитивных и серонегативных животных использовать отдельные доильные аппараты;

33.  выпаивать телят молоком от здоровых коров;

34.  обмывать вымя чистой водой и менять воду после каждой коровы;

35.  первые струйки молока сдаивать в отдельную посуду, а затем уничтожать;

36.  проводить своевременную диагностику и лечение маститов;

37.  при лечении коров антибиотиками соблюдать сроки ожидания, а полученное молоко в этот период использовать после кипячения в корм животным;

38.  обеспечить работников фермы сменной спецодеждой и обувью;

39.  повышать культуру производства и соблюдать правила личной гигиены.

2.6. Расчет экономической эффективности

На ферме СООО «Нива» Тельмановского района содержатся 231 РИД-позитивных животных, среди которых 30 коров и 37 телок.

Удой на одну фуражную корову за 2006 год составил 3254 кг молока. Цена одного литра молока составляет 1.20 грн., а цена одного киллограма живой массы говядины 7.0 грн.

По литературным данным (Кузин и др., 1997) корова, больная лейкозом, снижает молочную продуктивность в среднем на 5%.

1.  Рассчитаем количество недополученного молока:

За 100% принимаем продуктивность здоровых животных – 3254 кг молока, а продуктивность РИД-позитивных коров на 5% меньше, что составляет 95%.Отсюда, продуктивность больной коровы равна 3091 кг молока.

Рассчитаем ущерб от снижения продуктивности:

У2 = М (ВЗ – ВБ)Ц, где

М – количество инфицированных животных;

ВЗ – количество молока, полученное от здоровой коровы;

ВБ – количество молока, полученное от больной коровы;

Ц – цена 1 кг молока.

У2.1 = 30 (3254– 3091) 1.20 = 5868грн.

2.Ущерб от снижения мясной продуктивности телок положительно реагирующих на РИД.

У2.2 = 37 х 36,7 х 7.0= 9505 грн. где

37 – количество РИД-позитивных телок, гол.;

36,7 - количество кг мяса, недополученного от телок, больных лейкозом;

7.0 – закупочная цена 1 кг мяса КРС

Уобщ = У2.1+У2.2=5868+9505=15373

3. Рассчитаем затраты на проведение профилактических работ:

3.1. Затраты на проведение дезинфекции помещений:

1 т едкого натра стоит 1167 грн. Расход дезинфектанта на единицу площади составляет 1 л/м2. Используется 2% рабочий раствор. Размер дезинфицируемого помещения: 70 х 21 х 3,2 м.

Рассчитаем площадь обрабатываемого помещения:

S ПОЛА = 70 x 21 = 1470 м2

S ПОТОЛКА = 70 x 30 = 2100 м2

S 1 СТЕНЫ = 70 x 3,2 x 2 = 448 м2

S 2 СТЕНЫ= 21 x 3,2 x 2 = 134,4 м2

S ТРУБЫ, КОРМУШКИ = 250 м2

S ОБЩ. = 1470 + 2100+ 448+ 134,4 + 250 = 4402,4 м2

Для обработки одного типового коровника площадью 4402,4 м2 потребуется 4402,4 л 2% раствора едкого натра. Чтобы получить данное количество раствора необходимо взять 88 кг сухого едкого натра. В хозяйстве животные содержатся в 4 – х типовых коровниках, а дезинфекция проводится 8 раз в год, поэтому едкого натра потребуется в 28 раза больше, что будет составлять 88 х 28 =.2464 кг. Если цена 1 т едкого натра равна 1167 грн., то 2464 кг будет стоить 2875,5 грн.

Оплата рабочих на ДУКе – 25 грн., эксплуатация ДУКа – 75 грн. (25 + 75 ) х 8= 800 грн. Итого на дезинфекцию затрачено 2875,5 + 800 = 3675.5гривен.

3.2. Для проведения мероприятий по взятию крови привлекают дополнительно трёх человек с оплатой 3 грн. Затраты при этом составляют 8х3 х3=72грн. Зв=3675.5+72=3747,5

3.3. Предотвращённый экономический ущерб (Пу1) в результате профилактики и ликвидации лейкоза определяли по формуле:

Пу1=Мо х Кзх Кпх Ц-У где

Мо - общее поголовье восприимчивых животных в хозяйстве, голов

Кз - коэффициент возможных заболеваний животных

Кп - удельная величина экономического ущерба в расчёте на одно заболевшее животное

У - фактический экономический ущерб, грн

Пу1=670х 0.14 х36.7 х7.0-15373=8724.2 грн

3.4. Экономический эффект, полученный в результате осуществления мероприятий по профилактике лейкоза рассчитывали по формуле:

Эв=Пу1-Зв где

Пу - предотвращённый экономический ущерб, грн

Зв - затраты на профилактику и ликвидацию, грн

Эв= 8724,2-3747,5=4976,7 грн

3.5. Экономический эффект на одну гривну затрат рассчитывали по формуле

Эгрн= Эв/Зв где

Эв - экономический эффект полученный в результате проведения мероприятий по профилактике и ликвидации за заболевания, грн

Зв - затраты на профилактику и ликвидацию заболевания, грн

Эгрн= 4976,7/ 3747,5=1,3 грн

ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

В настоящее время организация способов борьбы с лейкозом крупного рогатого скота имеет большое народно – хозяйственное значение.

Во время прохождения производственной практики в Тельмановском районе я непосредственно принимал участие в :мероприятиях по оздоровлению крупного рогатого скота от лейкоза и выполнил следующее задание:

40.  изучил эпизоотическую ситуацию по лейкозу крупного рогатого скота в Раздольненском районе;

41. Принимал участие в мероприятиях по профилактике и ликвидации лейкоза крупного рогатого скота в СООО «Нива»;

42. Рассчитал экономические убытки от лейкоза крупного рогатого скота.

Первый случай лейкоза крупного рогатого скота в Тельмановском районе зарегистрирован в 1974 году в колхозе им. Калинина гистологическим методом. После проведения серологических исследований, в 1988 году, было установлено поражение КРС вирусом лейкоза во всех, без исключения, хозяйствах района. В результате проведённых мероприятий полное оздоровление, к настоящему моменту, достигнуто всего в двух хозяйствах. Степень инфицированности коров в отдельных хозяйствах района превышает 40 – 50 %.

Лейкоз крупного рогатого скота в СООО «Нива» Тельмановского района регистрируется с 1980 года. За последние четыре года процент поражённости стада увеличился с 25 % до 38,5 %.

Причинами низкого уровня оздоровления хозяйств района, а также увеличения числа больных животных в КСП им. Ленина служат:

43.  не проведение регулярных диагностических исследований продуктивного стада и отсутствие исследований у молодняка;

44.  передержка в стаде инфицированных вирусом животных;

45.  нарушения режима изолированного выращивания ремонтного молодняка;

46.  отсутствие родильных отделений для животных больных лейкозом, в следствии чего, отёл больных проводится вместе со здоровыми коровами;

47.  выпаивание телятам непастеризованного молока;

48.  не соблюдение правил асептики и антисептики при зоотехническом и ветеринарном обслуживании животных.

49.  несвоевременное осуществление дезинфекции помещений или полное её отсутствие.

Нами также был составлен план мероприятий по оздоровлению КСП им. Ленина от лейкоза крупного рогатого скота.

При исследовании РИД – позитивных коров положительную реакцию с сывороткой молока и молозива в реакции иммунодиффузии дают от 6 до 46,6 % животных. Поэтому, по нашим данным, использование РИД с сывороткой молока и молозива для выявления больных лейкозом коров возможно, но она не стабильна и не представляет диагностической ценности

3. ВЫВОДЫ

1.  За период с 1997 по 1999 годы, процент порежённости коров вирусом лейкоза крупного рогатого скота в Раздольненском районе возрос на 10 %.

2.  На конец декабря 2000 года в районе оздоровлено всего два хозяйства: ГПЗ «Славное» и КСП «Бакальский».

3.  В КСП им. Ленина Раздольненского района инфицированность стада за последние четыре года возросла с 25 % до 38,5 %.

4.  Реакция иммунодиффузии с сывороткой молока и молозива, с целью выявления больных лейкозом коров, не представляет диагностической ценности, так как даёт положительные результаты в 6 – 46,6 % случаях.

5. ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1.  Серологическое исследование серонегативных животных старше 4 – 6 месячного возраста проводить систематически с интервалом 30 – 45 дней;

2.  серопрзитивных животных старше двух лет исследовать клинико – гематологически в течении 15 дней после разделения стада, а далее один раз в год;

3.  животных с гематологическими признаками лейкоза в течении 15 дней после их выявления сдавать на убой;

4.  молоко от серопозитивных животных пастеризовать в хозяйстве при температуре 80 С, после чего его можно сдавать на молокозавод либо использовать для кормления телятам;

5.  молоко от гематологически больных коров уничтожать путём добавления к нему 5 % формальдегида.

6.  телят до 7 дневного возраста выпаивать материнским молоком, а далее пастеризовать и содержать на отдельной ферме.

7.  проводить дезинфекцию животноводческих помещений после каждого взятия крови и изоляции больных животных;

8.  отёл РИД – позитивных коров проводить в отдельном помещении;

9.  выделить для доения РИД – положительных коров отдельные аппараты;

10.  соблюдать правила асептики и антисептики при зооветмероприятиях.

4. СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Аминева С. П., Глобенко Л. А., Петров В. Н. и др. Использование моноклональных антител для диагностики лейкоза КРС. //Материалы международной конференции// Харьков, 1995 г. с. 240 – 243.

2. Андриян Е. А., Цымбал В. И., Ененко Н. Г. Эпизоотологическая роль машинного доения в распространении лейкоза крупного рогатого скота. //Материалы международной научной конференции.// Харьков, 1995 г. с. 162 – 164.

3. Аранчiй В., Русанова Г., Товма И., Нагаєва Л., Аранчiй С. єкономiчна ефективнiсть оздоровчих заходiв iз застосуванням вакцини проти лейкозу великоï рогатоï худоби., ж Ветеринарна Медицина Украïни, № 6, 1997 р., с 17.

4. Белов А. Д., Рогожина Л. В., Сноз Г. В. О патогенезе лейкозов крупного рогатого скота., ж Ветеринария, № 12, 1997 г., с. 16 – 19.

5. Галатюк О., Романишина Т., Жилiхiвський А. Эпiзоотологiчний монiторинг та проведення оздоровчих заходiв при лейкозi великоï рогатоï худоби Житомирськiй облостi // Ветеринарна медицина Украïни.- 2006. - №6 с.10-11.

6. Алiмов П. В. Оздоровлення господарств агрокомплексу ВАТ ММК iм. Iллiча в iд лейкозу великоï рогатоï худоби // Ветеринарна медицина Украïни.- 2007.-№11. с.10.

7. Бусол В. А. , Цымбал В. И., Ковалюшко В. С. Организация научно – обоснованных противолейкозных мероприятий в неблагополучных хозяйствах Украины. //Материалы международной научной конференции.// Харьков, 1995. С. 43 – 45.

8. Донник И. М., Татарчук А. Т. лейкоз крупного рогатого скота в экологически неблагополучных районах Урала //Материалы международной конференции// Харьков, 1995 г. с. 134 – 137.

9. Коромыслов Г. Ф., Бурба Г. Л., Нахмансон В. М. Основы профилактики и ликвидации лейкоза КРС., ж. Ветеринария, № 4, 1993 г., с. 7

10. Кузин А. И., Закрепина Е. Н. влияние лейкоза на продуктивность коров и качество молока., ж. Ветеринария, № 2, 1997 г., с. 19 - 21.

11. Кузнецова Н. В.,Кузнецов Н. В., Симонян Г. А. Использования полимеразной цепной реакции для выявления инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота., ж. Ветеринария, № 5, 1997 г. с. 12 – 15.

12. Малоголовкин С. А. Роль моноклональных антител в диагностике лейкоза крупного рогатого скота. , ж. Ветеринария, № 4, 1997 г., с. 16 – 19.

13. Мандыгра Н. С. Диагностическая ценность реакции диффузной преципитации ( РДП ) при лейкозе крупного рогатого скота. //Материалы международной научной конференции// Харьков, 1995 г. С. 243 – 245.

14. Мандигра М. Наукова – виробнича система « Орiон » у боротьбi з лейкозом великоï рогатоï худоби., ж. Ветеринарна медицина., квiтень 1998 р. с. 22 – 23.

15. Мандыгра Н. С. Эпизоотический процесс и эпизоотологическая эффективность мероприятий по борьбе с лейкозом крупного рогатого скота. //Материалы международной научной конференции// Харьков,1995. С. 20 – 23.

16. Мандигра М. С. єпiзоотологiчний монiторинг, профiлактика та системи лiквiдацiï лейкозу великоï рогатоï худоби в Украïнi., Автореферат дисертацiï на здобуття наукового ступеня доктора ветеринарних наук. Харкiв – 2000, 36 с.

17. Маринин Е. А., Кузнецов А. П. Прогнозирования сроков оздоровления хозяйств от лейкоза крупного рогатог скота., ж. Ветеринария, № 6, 1997 г. с. 17 – 20.

18. Нагаєва Л., Горжеєв В., Павленко М. та iн. Результати застосування у широкому виробничому дослiдi в системi чинних протилейкозних заходiв вакцини проти лейкозу великоï рогатоï худоби., ж. Ветеринарна медицина. травень 1998 р. с. 19 – 22.

19. Нагаева Л. И., Ковалюшко В. С., Прискока В. А. и др. Результаты исследования вакцины против лейкоза крупного рогатого скота. //Материалы международной научной конференции// Харьков, 1995 г.,с. 401 – 403. .

20. Нагаева Л. И., Цымбал В. И., Аранчий С. В. и др. Научно-производственное внедрение вакцины против лейкоза крупного рогатого скота в комплеке мероприятий по оздоровлению от лейкоза крупного рогатого скота. //Материалы международной научной конференции// Харьков, 1995 с. 404 – 497.

21. Ярчук Б., Тирсiн Р., Довгань О. Сучаснi аспекти дiагностики та заходiв боротьби з лейкозом великоï рогатоï худоби // Ветеринарна медицина Украïни.- 2006.- №9 с. 21-23.

22. Козаченко О. I., Блаженко А. П., Коваленко Л. В. Iєрархiя iнфекцiйного процессу при лейкозi великоï рогатоï худоби // Ветеринарна медицина Украïни.- 2006.- №3 с.29-30.

23. Петров Н. И. Оздоровление хозяйств против лейкоза крупного рогатого скота., ж. Ветеринария, № 9, 1997 г., с. 10.

24. Смирнов Ю. Влияние лейкоза на молочную продуктивность коров., ж. Молочное и мясное скотоводство., № 4, 1999 г. с. 23 – 25.

25. Смирнов Ю. П. Эффективность противолейкозных мероприятий в зависимости от кратности и интервалов серологических исследований., ж. Ветеринария, № 11, 1991 г. с. 29 – 30.

26. Снежков Н. И., Гулюкин М. И., Бурба Л. Г.и др. Биологические свойства молока и его роль в распространении возбудителя лейкоза крупного рогатого скота. ж., Ветеринария, № 11 1991 г. с. 30 – 34.

27. Вирусные болезни животных / В. Н. Сюрин, А. Я. Самуйленко, Б. В. Соловьёв, Н. В. Фомина / .- М. : ВНИТИБП, 1998. – С. 383- 406.

28. Тирсiн Р., Ярчук Б., Довгаль О. Вплив бiотичних факторiв на особливостi розвитку лейкозного процесу., ж. Ветеринарна медицина, № 6 1996 р., с. 17.

29. Хисамутдинов Ф. Ф. Племенной молодняк – источник вируса лейкоза крупного рогатого скота., ж. Ветеринария, № 3, 1996 г. с. 11.

30. Гулюкiн М. Т. Методи дiагностики лейкозу великоï рогатоï худоби та ïх оцiнка в системi протиепiзоотичних заходiв у Росiйськiй федерацii // ветеринарна медицина Украïни. – 2006. - №3 с.20-21.

31. Ярчук Б. М. , Домбровський О. Б., Тирсiн Р. В. та iн. Закономiрностi розвитку iнфекцiйного процесу при лейкозi в одновiковiй групi РiД – позитивних корiв з рiзним строком тiльностi. //Материалы международной научной конференции// Харьков, 1995 г. с. 662 – 664.

32. Инструкция по профилактике и оздоровлению крупного рогатого скота от лейкоза. Киев 1992 8 с.

33. Ferrer J. F. Bovine Lymphosarcoma // Advances in veterinary sciense and comparative medicine, 1980., V. 24. P. 1 – 68.

34. Van der Maaten M. J., Miller J. M., Boothe A. D. Replicating type – c virus particles in monolayer cell cultures ef tissues from cattle with lymphosarcoma// Natl. Cancer Inst. 1974. V. 52. P. 491 – 497.